葡萄球菌普遍分布于自然界，如空氣、水、土壤、飼料和一些物品上，還常見(jiàn)于人和動(dòng)物的皮膚及與外界相通的腔道中。葡萄球菌中，腐生葡萄球菌數(shù)量較多，一般不致病。表皮葡萄球菌致病較弱，金黃色葡萄球菌致病力較強(qiáng)，可產(chǎn)生腸有害元素、殺白血球素、溶血素等有害元素，引起食物中毒的是腸有害元素。金黃色葡萄球菌為革蘭陽(yáng)性球菌，呈葡萄串狀排列，無(wú)芽孢，無(wú)鞭毛，不能運(yùn)動(dòng)。適宜生長(zhǎng)溫度為35℃～37℃，但在0℃～47℃都可以生長(zhǎng)。菌體不耐熱，60℃的溫度下，30分鐘即可被殺死，但在冷藏環(huán)境中不易死亡。目前已經(jīng)確認(rèn)的至少有A、B、C1、C2、C3、D、E和F這8個(gè)型。A型腸有害元素引起的食物中毒較多，B型次之，C型較少。該有害元素的抗熱力很強(qiáng)，煮沸1～1.5小時(shí)仍保持其毒力，也不受胰蛋白酶影響。120℃的溫度下，20分鐘還不能完全破壞。枯草芽孢桿菌能夠增加土壤養(yǎng)分、改良土壤結(jié)構(gòu)、提高肥料利用率。木耳菌株

利用較低溫甘油保存法保存銅綠假單胞菌菌種時(shí)，要將保存的銅綠假單胞菌接種于1.7毫升肉湯管中，在37攝氏度恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)18小時(shí)后加人無(wú)菌甘油0.3毫升，使甘油濃度為15%，充分混勻，吸取1毫升分裝于無(wú)菌的冷凍管或1.5毫升離心管，封好蓋子，在-20攝氏度冰箱中放置3小時(shí)后，置-70攝氏度冰箱中長(zhǎng)期保存。菌種復(fù)蘇：從-70攝氏度冰箱中取出一只菌種保存管(已保存2年3個(gè)月)，迅速用接種環(huán)輕輕刮取幾下，轉(zhuǎn)種于已預(yù)溫到37攝氏度的普通瓊脂平板上，37攝氏度培養(yǎng)18~24小時(shí)。半固體保存法，要用接種針挑取少量菌苔移種于無(wú)菌半固體培養(yǎng)管，肉湯中加人瓊脂粉至終濃度為0.25%，于37攝氏度培養(yǎng)18小時(shí)；用無(wú)菌方法將培養(yǎng)管的軟木塞換為滅菌的橡膠塞后，放人菌種保存箱4攝氏度保存。雞胚雙歧桿菌菌株金黃色葡萄球?qū)Υ蟛糠志S生素的抗性得到了提高。

枯草芽孢桿菌在使用后，在土壤、植物表面都有一個(gè)定殖的過(guò)程，芽孢的活化、裂殖到一定數(shù)目都需要一定時(shí)間。這個(gè)過(guò)程還和環(huán)境濕度、溫度、pH等條件有關(guān)，一般枯草從使用到發(fā)揮效果要經(jīng)過(guò)7~15天的時(shí)間。所以使用枯草菌劑就像打疫苗，一定要提前使用。為了延長(zhǎng)菌株在土壤里的有效數(shù)量，實(shí)際使用時(shí)要每間隔15-20天施用一次，連續(xù)使用3~4次。過(guò)程雖然有些繁瑣，但是一旦枯草桿菌開(kāi)始發(fā)揮效果，持效期比一般化學(xué)藥劑要長(zhǎng)，而且殺菌更加徹底。此外，在選擇枯草產(chǎn)品時(shí)一定注意證件是否齊全，是否真實(shí)。真正的枯草芽孢桿菌產(chǎn)品對(duì)植物是沒(méi)有傷害的。

銅綠假單胞菌的液氮較低溫保存法，將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中，密封于安瓿管內(nèi)，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至-35攝氏度時(shí)，即可置于-150攝氏度～-196攝氏度的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法保存。微生物菌種應(yīng)保藏于低溫、清潔和干燥的地方，室溫放置時(shí)問(wèn)過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致菌種衰退；菌種操作應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行，防止雜菌污染，斜面菌種保藏時(shí)間通常為1-2個(gè)月，應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時(shí)轉(zhuǎn)接；凍干菌種保藏時(shí)間通常為5~10年；菌種使用過(guò)程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降，應(yīng)及時(shí)更換新的菌種。金黃色葡萄球菌代謝類型為需氧或兼性厭氧，對(duì)環(huán)境要求不高。

金黃色葡萄球菌對(duì)宿主的傳染分為粘附、侵入兩個(gè)階段。金黃色葡萄球菌侵染宿主的不同階段，需要不同的致病因子發(fā)揮作用。在傳染的早期階段，它主要通過(guò)纖維蛋白原，纖連蛋白和細(xì)胞角蛋白定植在機(jī)體的表皮內(nèi)。在指數(shù)階段的早期，它會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞壁相關(guān)因子，使菌體積聚并形成生物膜，促進(jìn)其對(duì)宿主細(xì)胞或組織粘附以及逃避宿主免疫系統(tǒng)的清理。一旦菌體達(dá)到指數(shù)期后期，它便開(kāi)始下調(diào)細(xì)胞壁相關(guān)因子，使生物膜分散，同時(shí)分泌出一系列外蛋白，包括蛋白酶、溶血素、超抗原等，傳染宿主細(xì)胞或組織。在侵染機(jī)體的整個(gè)過(guò)程中，金黃色葡萄球菌表面蛋白在生物膜形成、突破宿主防御系統(tǒng)、免疫逃避等方面發(fā)揮重要作用，這些表面蛋白是現(xiàn)階段金黃色葡萄球菌疫苗研究目標(biāo)之一。銅綠假單胞菌的o抗原含有內(nèi)毒養(yǎng)素和原內(nèi)毒養(yǎng)素蛋白質(zhì)兩種成份。木耳菌株

枯草芽孢桿菌菌體自身會(huì)合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纖維素酶等酶類。木耳菌株

銅綠假單胞桿菌凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜（DMSO）對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜（DMSO）選擇進(jìn)口產(chǎn)品。離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。離心問(wèn)題目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，然后過(guò)段時(shí)間之后再進(jìn)行換液。在土壤濕度15-30%時(shí)，銅綠假單胞菌可生長(zhǎng)繁殖。木耳菌株

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