銅綠假單胞桿菌的凍結保存記錄內容包括冷凍的日期、細胞代號、冷凍管數、冷凍保存中溫度下降的情況、保存位置以及操作者。不使用銅綠假單胞桿菌前,要使用高壓蒸汽滅菌,其自身具有殺菌作用。高壓滅菌反而破壞了其分子結構,可以降低冷凍保護的效果。對細胞注意凍結保存管投入液氮,操作簡單地從液氮向液氮罐內迸發。如果液氮可能會迸發,會凍壞皮膚。操作中盡量帶防寒手套、口罩、工作服或防寒鞋。要注意控制冰箱的質量。在凍結之前確保細胞有活力,沒有微生物污染,值得凍結在這樣的細胞上。另外,幾個細胞凍結后,使1~2管復活,觀察其活力,觀察微生物是否受到污染。枯草芽孢桿菌有著很好的促生作用。抱川類芽孢桿菌菌種
SHBCCD24858白曲霉Aspergillusalbus制作酒曲SHBCCD24859米曲霉Aspergillusoryzae制作酒曲SHBCCD24860黑曲霉Aspergillusniger制作酒曲SHBCCD24861米曲霉Aspergillusoryzae用于釀造醬油、米酒等。SHBCCD24862米曲霉Aspergillusoryzae用于釀造醬油、米酒等。SHBCCD24863黑曲霉Aspergillusniger用于釀造醬油SHBCCD24864深紅酵母Rhodotorularubra用于釀造醬油SHBCCD24865魯氏酵母Saccharomycesrouxii醬油、食醋、酒發酵后期生香SHBCCD24866蒙奇球擬酵母Torulopsismogii醬油、食醋、酒發酵后期生香SHBCCD24867植質乳桿菌Lactobacillusplantarum醬油、食醋、酒發酵后期生香SHBCCD24868黑曲霉Aspergillusniger酒精,白酒生產糖化菌。SHBCCD24855粟酒裂殖酵母Schizosaccharomycespombe釀酒SHBCCD24856季也蒙邁耶氏酵母Meyerozymaguilliermondii自我分離SHBCCD24857微桿菌屬Microbacteriumsp.SHBCCD24858鞘氨醇單胞菌屬Sphingomonassp.SHBCCD24859異常威克漢姆酵母Wickerhamomycesanomalus釀酒葡萄園有孢漢遜酵母菌種金黃色葡萄球是常見的化膿性球菌,是醫院交叉傳染的重要來源。
高活性枯草芽孢桿菌菌株是其普遍應用的重要前提。枯草芽孢桿菌篩選可依據形態特性、產酶能力、抑菌能力和抗逆性分析等方法在動物腸道、植物根際、土壤環境、發酵體等環境中分離,并進行分子生物學及生理生化鑒定,以挑選出性能優良的菌株。篩選出性能優良的菌株后,如何獲得有效生物量更高的產品,是枯草芽孢桿菌工業化生產中的中心問題。目前,應用于工業化的發酵工藝主要有以下3種:液態發酵、固態發酵和液固兩相發酵。實際生產中,以液態發酵為主。液態發酵是將活化菌種接種到發酵罐中,進行液體培養的方法。其一般流程為菌種接種,發酵罐培養、過濾、濃縮、干燥從而得到菌劑。
關于銅綠假單胞菌的砂土保存法,主要是取清潔的砂,過60目篩去掉大砂粒,并用磁鐵吸去砂中鐵屑,再用NaOH溶液、10%HCl溶液和水交替清洗數次,干燥后,置于試管或安瓶管中保持2~3cm深,再經干熱滅菌后,加入1毫升菌種培養液,經充分混勻后,放入真空干燥器中,完全干燥后熔封保存。也可用二份洗凈的砂(經HCl預處理)和一份貧瘠、過篩的黃土攙和后滅菌,再進行菌種保藏。在螺旋口試管中裝入1/2管高的硅膠(或無水CaSO4),上鋪玻璃棉,再放上10~20粒磁珠,經干熱滅菌后,接入菌懸液,然后冷藏、室溫保藏或減壓干燥后密封保藏。本法對酵母菌很有效,特別適用于根瘤菌,可保存長達兩年半時間。金黃色葡萄球在血瓊脂平板上形成的菌落較大,有的菌株菌落周圍形成明顯的完全透明溶血環(β溶血)。
保存的銅綠假單胞菌復蘇時,直接從菌種保存管挑取少量細菌移種普通瓊脂平板或肉湯管,于37攝氏度培養18~24小時。主要生化指標檢測,取較低溫甘油保存法和半固體保存法兩種保存法保存的菌種分別進行42攝氏度生長試驗、氧化酶試驗、氧化-發酵試驗、動力試驗及明膠液化試驗檢測。半固體保存法在3個月內復蘇,細菌生長良好,但在6個月后復蘇,存活率降低,只達30%。移種普通瓊脂平板上無肉眼可見的藍綠色的色素產生,需連續移種3~4次后才可見到色素產生。改良的方法使菌種保存已達27個月,期間分別在6、12、18、24、27個月時復蘇,均可見綠膿桿菌在普通瓊脂平板上生長良好,可見圓形、大小不一、光滑、濕潤、邊緣不整齊的扁平菌落,菌落周圍的瓊脂被染成藍綠色;細菌存活率為100%。枯草芽孢桿菌可提高動物體(人體)內干擾素和巨噬細胞的活性。烏茲別克斯坦長西氏酵母菌種
金黃色葡萄球可制成傳染鋼片和染菌布片。抱川類芽孢桿菌菌種
凍存銅綠假單胞桿菌時,要先消化細胞,將細胞懸液收集至離心管中。1000rpm離心10分鐘,棄上清液。沉淀加含保護液的培養,計數,調整至5×106/毫升左右。將懸液分至凍存管中,每管1毫升。將凍存管口封嚴。如用安瓿瓶則火焰封口,封口一定要嚴,否則復蘇時易出現爆裂。貼上標簽,寫明細胞種類,凍存日期。凍存管外拴一金屬重物和一細繩。按順序降溫,室溫→4攝氏度(20分鐘〕→冰箱冷凍室(30分鐘)→低溫冰箱(-30攝氏度1小時)→氣態氮(30分鐘)→液氮。注意操作時應小心,以免液氮凍壞。液氮定期檢查,隨時補充,不能揮發干凈,一般30立升的液氮能用1~1.5月。抱川類芽孢桿菌菌種
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