培養基中谷氨酰胺作用及使用方法?幾乎所有的細胞對谷氨酰胺有較高的要求,細胞需要谷氨酰胺合成蛋白質,在缺少谷氨酰胺時,細胞生長不良而死亡。所以,各種培養液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩定,應置-20℃ 冰凍保存,用前加入培養基中。加有谷氨酰胺的液體培養基 4℃冰箱儲存兩周以上時,應重新加入原來量的谷氨酰胺。GlutaMAX-I是什么?培養細胞如何利用GlutaMAX-I?這個二肽有多穩定?GlutaMAX-I 即谷丙氨酸二肽,是一個L-谷氨酰胺的衍生物,其不穩定的 alpha-氨基用L-丙氨酸來保護。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I 二肽非常穩定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有較小的降解,如果在相同條件下,L-谷氨酰胺幾乎完全降解。Elliker瓊脂 RSMA培養基 脫脂乳培養基 改良番茄汁肉湯培養基 番茄汁瓊脂MRS肉湯(不含葡萄糖)。含慶大霉素的BCSA增菌液
在培養基中加人某種抑制劑和指示劑,抑制某些細菌生長,促進目的菌的繁殖,并使所生長的細菌菌落具有一定特征,以助鑒別挑選,這類培養基稱為選擇性鑒別培養基。如SS瓊脂,在該培養基配方中含有乳糖(反應底物)、中性紅和檸檬酸鐵銨(指示劑)、燦爛綠及膽鹽等(抑菌劑)。燦爛綠和膽鹽等抑菌劑能抑制革蘭氏陽性菌及部分大腸埃希菌的生長,而對沙門菌及志賀菌基本無影響,而且大腸埃希菌能發酵乳糖產酸,使菌落變紅色,沙門菌和志賀菌不發酵乳糖,其菌落為無色。如細菌產生硫化氫,則與檸檬酸鐵銨反應生成硫化亞鐵沉淀,菌落中心呈黑色或褐色。以此達到鑒別的目的。沙氏葡萄糖液體培養基肉肝胃消化干粉培養基 多殺性巴氏桿菌培養基 克羅諾桿菌顯色培養基(CCI)。
細胞培養過程中,細胞培養基是不可或缺的,細胞培養基既是培養細胞中供給細胞營養和促使細胞生殖增殖的基礎物質,也是培養細胞生長和繁殖的生存環境。通常細胞體外培養時需要加入血清,以維持細胞的生長和存活。而除了血清之外,部分細胞在培養過程中需要添加胰島素和β-巰基乙醇(β-mercaptoethanol)等成分來維持細胞狀態。MCF-7和NIH:OVCAR-3等細胞需要額外添加胰島素,而Thp-1和MC3T3-E1 subclone 14等細胞則需要添加β-巰基乙醇,不同細胞加入量會有差異,需根據細胞類型判斷。
T3031雙歧桿菌活化培養基配方:(/L)大豆蛋白胨5.0g胰胨5.0g酵母提取物10.0g葡萄糖10.0gCaCl28mgMgSO419.2mgK2HPO440mgKH2PO440mgNaHCO30.4gNaCl80mgL-半胱氨酸0.5g0.1%刃天青1mg瓊脂15.0g使用方法:稱量本品46.09克溶解于1000ml的蒸餾水或去離子水中,然后121度高壓滅菌15min,冷卻至55度后傾注至培養皿中,凝固后可見培養基變成紅色。當在厭氧環境下培養后,紅色會消失,變成培養基本身的黃色,則說明此時環境是厭氧環境,否則不是厭氧環境。T3032CFU培養基基礎250g/瓶290培養基配方(/L)混合蛋白胨20.0g氯化鈉5.0g葡萄糖1.0g營養酵素5.0gpH7.3±0.2(25℃)使用說明稱取本品31.0g于1L蒸餾水或去離子水中,微溫溶解,分裝,121℃高壓滅菌15分鐘或115℃滅菌30分鐘,冷卻,備用。T3033SDC液體培養基250g/瓶培養基配方(/L):葡萄糖20g/LYNB1.7g/L硫酸銨5g/L腺嘌呤40mg/L尿嘧啶100mg/LL-精氨酸20mg/LL-天冬氨酸100mg/LL-谷氨酸100mg/LL-組氨酸100mg/LL-亮氨酸300mg/LL-賴氨酸150mg/LL-蛋氨酸20mg/LL-苯丙氨酸50mg/LL-絲氨酸400mg/LL-蘇氨酸200mg/LL-色氨酸40mg/LL-酪氨酸40mg/LL-纈氨酸150mg/L使用方法:稱量本品28.36g溶解于1000ml蒸餾水或去離子水中,0.22um過濾滅菌,然后備用。Endo培養基遠藤瓊脂培養基 A1 培養基 MUG營養瓊脂培養基(NA-MUG)DEV乳糖蛋白胨肉湯麥康凱瓊脂(不含結晶紫)。
蛋白胨淀粉酵母培養基配方:(/L)蛋白胨???(25℃)使用方法:取本品粉末,加熱沸騰后分裝,121度滅菌15分鐘后,待溫度降至55度時加入50ml脫纖維羊血,傾注至培養皿凝固后冷藏待用。哥倫比亞培養基培養基配方:(/L):取本品粉末,加熱沸騰后分裝,121度滅菌15分鐘后,待溫度將常溫后,加入50ml脫纖維羊血,待用。大腸桿菌MS2噬菌體液體培養基培養基配方(/L)YeastExtract(酵母浸膏)(胰蛋白胨)(氯化鈉)±(25℃)使用說明稱取本品(后者效果更佳),加熱煮沸1分鐘使徹底溶解,分裝,121℃高壓滅菌15分鐘,冷卻,備用。磷酸鹽緩沖液配制方法:磷酸氫二鈉,氯化鈉,氯化鉀,(/L)YeastExtract(酵母浸膏)(胰蛋白胨)(氯化鈉)±(25℃)使用說明稱取本品(后者效果更佳),加熱煮沸1分鐘使徹底溶解,分裝,121℃高壓滅菌15分鐘,冷卻,備用。磷酸鹽緩沖液配制方法:磷酸氫二鈉,氯化鈉,氯化鉀。 葡萄糖瓊脂 動力-吲哚-尿素(MIU)培養基基礎 V-P半固體瓊脂(VP) 西蒙氏檸檬酸鹽瓊脂枸櫞酸鹽瓊脂。MH肉湯
NGKG瓊脂基礎 酪蛋白瓊脂 酚紅葡萄糖肉湯 溶菌酶營養肉湯基礎 胰酪胨大豆多粘菌素肉湯(TSPB)基礎。含慶大霉素的BCSA增菌液
還有一些鑒別性培養基,是利用細菌特有的各種酶系統,能分解利用各種特定的糖、醇、氨基酸或其他基質而產酸、產氣、產堿或產生其他可見物質,依此進行細菌的鑒別,例如常用的生化培養基。用于細菌生化特性試驗的培養基特點是在無糖的基礎培養基中加人某種特定的基質,并加人指示劑,細菌在此類培養基中的一系列生化反應結果,均通過指示劑顯示出來。此類培養基為生化反應鑒別培養基。根據用量又可分為常量生化培養基和微量生化培養基。值得注意的是生化試驗培養基的某些成分受高溫、pH等諸多因素的影響,在配制和使用時,應根據實際情況嚴格掌握,防止有效成分被破壞,以保障其使用效果。含慶大霉素的BCSA增菌液
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