培養基(Medium)是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養料,一般都含有水、氮源、無機鹽(包括微量元素)、碳源、生長因子(維生素、氨基酸、堿基、色素和血清等)等。培養基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養基在受熱、吸潮后,易被細菌污染或分解變質,因此一般培養基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴格滅菌的培養基(如組織培養基),較長時間的貯存,必須放在3-6℃的冰箱內。由于液體培養基不易長期保管,均改制成粉末。蛋白胨-氯化鈉-纖維二糖-多黏菌素E(PNCC)增菌液 脫脂奶蔗糖蛋白胨培養基 改良的酵母浸汁-孟加拉紅肉湯。脫硫弧菌培養基添加劑
天然培養基是指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養基,如血漿、血清、、雞胚浸出液等。組織培養技術建立早期,體外培養細胞都是利用天然培養基。但是由于天然培養基制作過程復雜、批間差異大,因此逐漸為合成培養基所替代。普遍使用的天然培養基是血清,另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質在培養某些特殊細胞也是必不可少。血清質量高低取決于兩方面因素:一是取材對象,二是取材過程。用于取材的動物應健康無病并且在指定的出生天數之內,取材過程應嚴格按照操作規程執行,制備出的血清要經過嚴格的質量鑒定。查氏培養基/察氏瓊脂堿性蛋白胨水(APW) 42℃生長試驗用培養基(弧菌用) 改良R2A瓊脂 BTB瓊脂。
選擇性培養基(selective media) 選擇性培養基含有營養物(增菌劑)和抑菌劑(選擇劑),標本接種于此類培養基后,由于抑菌劑的選擇性抑制作用,使非目的菌受到不同程度的抑制,更有利于目的菌的增殖或分離。利用選擇性培養基經過一定時間的增菌培養,再接種于選擇性鑒別培養基,可以提高目的菌的陽性檢出率。抑菌劑的種類很多,常用的有孔雀綠、燦爛綠、亞硒酸鈉、去氧膽酸鈉、膽鹽、四硫磺酸鈉等。抑菌劑的加入量要適宜、準確,有的劇毒,有的不耐高熱,配制時須特別注意。
培養細胞時應使用5%還是10%CO2,或者根本沒有影響?一般培養基中大都使用 HCO3-/CO32-/H+ 作為pH的緩沖系統,而培養基中NaHCO3的含量將決定細胞培養時應使用的CO2濃度。當培養基中 NaHCO3含量為每公升3.7g時,細胞培養時應使用10% CO2;當培養基中NaHCO3 為每公升1.5g時,則應使用5%CO2培養細胞。NaHCO3的作用:培養基中使用了 NaHCO3-CO2 緩沖系統,并采用開放培養,使細胞代謝產生的CO2及時溢出培養瓶,再通過穩定調節溫箱中CO2濃度(5%) ,與培養基中的NaHCO3處于平衡狀態,從而調節培養基的PH值。NEAA:非必須氨基酸,NEAA(非必需氨基酸) 是含幾種非必需氨基酸的合劑,添加到的原培養基不同,NEAA 也有不同的種類,比如添加至MEM的NEAA,含L-Alanine、L-Asparagine、L-Aspartic Acid、 L-Glutamic Acid、L-Glycine、L-Proline、L-Serine。胰酪胨大豆羊血瓊脂TSSB基礎 桑塔斯瓊脂基礎 Spizizen馬鈴薯瓊脂 雙歧桿菌生化管用基礎培養基 BBL液體培養基。
培養基按成分分類有哪些?上海瑞楚生物科技有限公司小編介紹,根據培養基的組成成分,可分為天然培養基和合成培養基兩大類。天然培養基(native medium) 含有不完全明了化學成分的天然物質。如蛋白胨、牛肉膏(粉)、肉浸液、玉米漿、血液、馬鈴薯等。用此類材料配成的培養基很難做到不同批號之間質量的穩定一致,因此在選用原料時務必注明其商品名稱、生產廠家及批號,對不同來源的原料應先做小樣試驗。此種培養基成本較低,細菌繁殖較好,一般細菌培養以選用天然培養基為主。PBS-Tween20洗液 卵磷脂多價胨稀釋液基礎 30%葡萄糖溶液(pH6.5±0.5) 1.5%蛋白胨水。Landy培養基
改良巴爾斯氏培養基基礎(含2.5%NaCl) 桑塔基氏培養基基礎 改良桑塔基氏培養基基礎。脫硫弧菌培養基添加劑
培養基中谷氨酰胺作用及使用方法?幾乎所有的細胞對谷氨酰胺有較高的要求,細胞需要谷氨酰胺合成蛋白質,在缺少谷氨酰胺時,細胞生長不良而死亡。所以,各種培養液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩定,應置-20℃ 冰凍保存,用前加入培養基中。加有谷氨酰胺的液體培養基 4℃冰箱儲存兩周以上時,應重新加入原來量的谷氨酰胺。GlutaMAX-I是什么?培養細胞如何利用GlutaMAX-I?這個二肽有多穩定?GlutaMAX-I 即谷丙氨酸二肽,是一個L-谷氨酰胺的衍生物,其不穩定的 alpha-氨基用L-丙氨酸來保護。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I 二肽非常穩定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有較小的降解,如果在相同條件下,L-谷氨酰胺幾乎完全降解。脫硫弧菌培養基添加劑
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