對銅綠假單胞桿菌的復蘇，要先準備一個茶缸或1000毫升的燒壞，內裝2/3杯37攝氏度的溫水，從液氮中取出凍存管、迅速置于溫水中并不斷攪動。使凍存管中的凍存物在1分鐘之內融化。打開凍存管，將細胞懸液吸到離心管中。1000rpm離心10分鐘，棄去上清液。沉淀加10毫升培養液，吹打均勻，再離心10分鐘，棄上清液。加適當培養基后將細胞轉移至培養瓶中，37攝氏度培養，第二天觀察生長情況。器材通常為液氮罐、凍存管（塑料螺口凍存管或安瓿瓶）、離心管、吸管、離心機等。試劑通常為0.25％胰酶、培養基、含保護劑的培養基（即凍存液）。凍存液配制是培養基加入甘油或DSMO，使其終濃度達5—20%。保護劑的種類和用量視不同細胞而不同。配好后4攝氏度下保存。大腸桿菌是條件致病菌。尖孢隔指孢菌種

埃希菌大小在寬0.4--0.7μm，長約1--3μm。革蘭陰性。多數菌株有周身鞭毛，能運動。有菌毛，包括普通菌毛和性菌毛。有些菌株可以有致病性菌毛。腸外傳染菌株常含有多糖包膜，即微莢膜。埃希菌兼性厭氧，對營養要求不高。普通瓊脂平板培養37℃的環境24小時后，形成直徑2-3mm的圓形凸起灰白色S型菌落。在人和動物腸道中繁殖卻速度比較慢一些，成倍增長的時間為一天。在肥沃的土壤表層可存活數月。有些菌株在血瓊脂平板上呈β溶血。在液體培養基中呈均勻渾濁生長。適合的溫度范圍是15--45℃。有些菌株對熱 的抗性比較強，在60℃仍可存活15分鐘。弓背蟻諾卡氏菌菌種不同的大腸桿菌有不同的培養原理。

凍干粉菌種復蘇中注意事項為：菌種活化前，如要長期保藏，可將凍干管放在-20度條件下保存。此凍干菌是經凍干燥并抽真空保存的，開啟后必須一次使用完，不能剩菌粉下次使用。凍干管中大部分是用牛奶做保護劑，菌體為少數，復蘇時要全部菌懸液接種在新鮮培養基上，否則可能造成復蘇不成功。凍干粉是在凍干燥保存后處于休眠狀態，有時延滯期較長，如在說明書建議的培養時間還未長出，請繼續在相應的環境下多培養24小時或更長時間，直至菌種培養出。

實驗室所配備的離心機應在生物安全柜或本標準4.2.2中所指的其他安全設備中使用，否則必須使用安全密封的專門用的離心杯。必須給實驗室工作人員配備必要的人員防護用品。實驗室設計與建造的特殊要求。包括：實驗室的選址、平面布置、實驗室結構、通風空調、安全裝置及特殊設備等設計與建造的特殊要求。 安全操作流程：本標準針對不同等級的生物安全防護實驗室所規定的安全操作流程，包括標準的安全操作流程和特殊的安全操作流程，必須在實驗室的生物安全手冊中明列并加以執行。針對不同的微生物及其病毒應補充規定相應的特殊安全操作流程，也應在各實驗室的生物安全手冊中明列并加以執行。病原微生物及其病毒在實驗室之間的傳遞，病原微生物及其病毒在實驗室之間的傳遞必須嚴格按照國家現行有關管理辦法執行。枯草芽孢桿菌的菌落表面粗糙不透明，污白色或微黃色。

實驗室生物安全防護：實驗室工作人員所處理的實驗物件含有致病的微生物及其病毒時，通過在實驗室設計建造、使用人員防護設置、嚴格遵從標準化的工作及操作程序和規程等方面採取綜合措施，確保實驗室工作人員不受實驗物件侵染，確保周圍環境有受其污染。微生物危害評估：對實驗微生物和病毒可能給人或環境帶來的危害所進行的評估。氣膠：懸浮于氣體介質中粒徑一般為0.001μm~1000μm的固體、液體微小粒子形成的膠溶狀態分散體系。生物安全柜：處理危險性微生物時所用的箱形空氣凈化安全裝置。CLASS I級生物安全柜：至少裝置一個高效率濾網HEPA對排氣進行凈化，工作時柜正面玻璃推拉窗打開一半，上部為觀察窗，下部為操作視窗，外部空氣由操作視窗吸進，而不可能由操作視窗逸出。工作狀態時保證工作人員不受侵害，但不保證實驗物件不受污染。菌株的篩選和改造需要具備高通量篩選技術和基因編輯技術的支持。虎林游動放線菌菌種

菌株的分類學和鑒定需要進行多維度分析，包括形態、生理和分子特征等。尖孢隔指孢菌種

銅綠假單胞桿菌的凍干菌種是經冷凍干燥并抽真空保存的，開啟后必須一次使用完，不能留菌粉下次再用，另外安瓿管里大部分仍是用牛奶作為保護劑，里面菌體為少數，復蘇時要全部菌懸液接在新鮮培養基上，否則可能造成復蘇不成功。菌種活化前，如要長期保藏，請將安瓿管保存在4-10攝氏度的環境下。操作前如有不明白之處，應先咨詢專業人員，避免不必要的損失。菌種操作應在在無菌條件下進行；轉鐘完畢，廢棄物應經滅菌再做丟棄處理，以免污染周圍環境。復蘇后，微生物菌種應保藏于建議的溫度、清潔和干燥的地方，室溫放置時間過長或導致菌種衰退。尖孢隔指孢菌種

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