細(xì)菌培養(yǎng)基之根瘤菌培養(yǎng)基:葡萄糖10g,磷酸氫二鉀0.5g,碳酸鈣3g,硫酸鎂0.2g,酵母粉0.4瓊脂20g,水1000ml,1%結(jié)晶紫溶液1ml。先把瓊脂加水煮沸溶解,然后分別加入其他組分,攪拌使溶解后,分裝,滅菌,備用。放線菌培養(yǎng)基:(1)淀粉硝酸鹽培養(yǎng)基(高氏一號(hào)培養(yǎng)基)可溶性淀粉2.0g,硝酸鉀0.1g,磷酸氫二鉀0.05g,氯化鈉0.05g,硫酸鎂0.05g,硫酸亞鐵0.001g,瓊脂2g,水100ml。先把淀粉放在燒杯里,用5ml水調(diào)成糊狀后,倒入95ml水,攪勻后加入其他藥品,使它溶解。在燒杯外做好記號(hào),加熱到煮沸時(shí)加入瓊脂,不停攪拌,待瓊脂完全溶解后,補(bǔ)足失水。調(diào)整pH值到7.2-7.4,分裝后滅菌,備用。致病菌常用的培養(yǎng)基包括營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖瓊培養(yǎng)基。Vogel-Johnson瓊脂基礎(chǔ)
培養(yǎng)基的pH必須控制在一定的范圍內(nèi),以滿足不同類型微生物的生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物。各類微生物生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的較適pH條件各不相同,一般來(lái)講,細(xì)菌與放線菌適于在pH7-7.5范圍內(nèi)生長(zhǎng),酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范圍內(nèi)生長(zhǎng)。值得注意的是,在微生物生長(zhǎng)繁殖和代謝過(guò)程中,由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被分解利用和代謝產(chǎn)物的形成與積累,會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基pH發(fā)生變化,若不對(duì)培養(yǎng)基pH條件進(jìn)行控制,往往導(dǎo)致微生物生長(zhǎng)速度下降或(和)代謝產(chǎn)物產(chǎn)量下降。因此,為了維持培養(yǎng)基pH的相對(duì)恒定,通常在培養(yǎng)基中加入pH緩沖劑,常用的緩沖劑是一氫和二氫磷酸鹽(如KH2PO4和K2HPO4)組成的混合物。K2HPO4溶液呈堿性,KH2PO4溶液呈酸性,兩種物質(zhì)的等量混合溶液的pH為6.8。當(dāng)培養(yǎng)基中酸性物質(zhì)積累導(dǎo)致H+濃度增加時(shí),H+與弱堿性鹽結(jié)合形成弱酸性化合物,培養(yǎng)基pH不會(huì)過(guò)度降低;如果培養(yǎng)基中OH-濃度增加,OH-則與弱酸性鹽結(jié)合形成弱堿性化合物,培養(yǎng)基pH也不會(huì)過(guò)度升高。葡萄糖肉湯培養(yǎng)基的傳遞需要在制備和使用期間保持良好的無(wú)菌技術(shù),避免細(xì)菌交叉污染。
通常用心、腦或其他臟器浸液配制厭氧菌培養(yǎng)基,并常需加入硫乙醇酸鈉、半胱氨酸、肉渣、還原鐵、活性炭等還原劑或除氧材料。在液體培養(yǎng)基中還可加入刃天青或亞甲基藍(lán)作為氧化還原指示劑,以觀察培養(yǎng)基的含氧程度。心、腦浸液、肝塊、肉渣中含有不飽和脂肪酸,能吸收培養(yǎng)基中的氧。硫乙醇酸鈉、半胱氨酸是較強(qiáng)的還原劑,能消耗溶解在培養(yǎng)基中的氧。干燥的活性炭和脫脂棉同樣能吸收培養(yǎng)基中的氧。所以培養(yǎng)基中加入還原劑和吸收材料,目的都是為造成培養(yǎng)基的缺氧環(huán)境,使培養(yǎng)基保持較低的氧化還原電勢(shì)。此外,還可在培養(yǎng)基表面加一層液體石蠟,以隔絕培養(yǎng)基與大氣的接觸。
培養(yǎng)基中谷氨酰胺作用及使用方法?幾乎所有的細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺有較高的要求,細(xì)胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì),在缺少谷氨酰胺時(shí),細(xì)胞生長(zhǎng)不良而死亡。所以,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應(yīng)置-20℃ 冰凍保存,用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基 4℃冰箱儲(chǔ)存兩周以上時(shí),應(yīng)重新加入原來(lái)量的谷氨酰胺。GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細(xì)胞如何利用GlutaMAX-I?這個(gè)二肽有多穩(wěn)定?GlutaMAX-I 即谷丙氨酸二肽,是一個(gè)L-谷氨酰胺的衍生物,其不穩(wěn)定的 alpha-氨基用L-丙氨酸來(lái)保護(hù)。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I 二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有較小的降解,如果在相同條件下,L-谷氨酰胺幾乎完全降解。培養(yǎng)基是一種含有必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的生長(zhǎng)介質(zhì),用于細(xì)胞、細(xì)菌的培養(yǎng)和繁殖。
HBS 和 EBS 的主要差別在于碳酸氫鈉的水平,在 Eagle′s(2.2g/L) 中比在 Hanks′(0.35g/L)中高。碳酸氫鈉需用高水平的 CO2 平衡,以維持溶液的 PH 值。Eagle′s 液在空氣水平的CO2中,溶液會(huì)變堿,Hanks′液在 CO2 培養(yǎng)箱中會(huì)變酸。如果希望在CO2培養(yǎng)箱中保存組織,需要用Eagle′s液,如果只是清洗將要在細(xì)胞培養(yǎng)基中儲(chǔ)存的組織,用Hanks′液就可以了。由于大多數(shù)細(xì)胞適宜pH為7.2-7.4,偏離此范圍可能對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)將產(chǎn)生有害的影響。但各種細(xì)胞對(duì)pH的要求也不完全相同,原代培養(yǎng)細(xì)胞一般對(duì)pH變動(dòng)耐受差,無(wú)限細(xì)胞系耐受力強(qiáng)。但總體來(lái)說(shuō),細(xì)胞耐酸性比耐堿性強(qiáng)一些。在配制培養(yǎng)用液時(shí),需要注意一點(diǎn):新配的培養(yǎng)基在經(jīng)過(guò) 0.10um 或 0.22um 濾膜過(guò)濾時(shí),溶液的pH 還會(huì)向上浮動(dòng)0.2左右。含血清培養(yǎng)基是一種以動(dòng)物血清為主的培養(yǎng)基普遍用于誘導(dǎo)細(xì)胞分化和胚胎發(fā)育研究等方面。腦膜炎奈瑟氏菌糖發(fā)酵瓊脂基礎(chǔ)
常見(jiàn)的培養(yǎng)基包括LB培養(yǎng)基、TSB培養(yǎng)基等。Vogel-Johnson瓊脂基礎(chǔ)
培養(yǎng)基的分類有幾種呢?按照培養(yǎng)基用途區(qū)分:1.基礎(chǔ)培養(yǎng)基,一類含有一般微生物生長(zhǎng)繁殖所需基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。2.加富培養(yǎng)基,一類在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入血、血清、動(dòng)植物組織提取液制成的培養(yǎng)基。用于培養(yǎng)要求比較苛刻的某些微生物。3.選擇培養(yǎng)基,一類根據(jù)某微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基,具有使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌的功能,普遍用于菌種篩選等領(lǐng)域。Vogel-Johnson瓊脂基礎(chǔ)
上海瑞楚生物科技有限公司是一家集生產(chǎn)科研、加工、銷售為一體的****,公司成立于2012-11-29,位于寶安公路4997號(hào)2號(hào)樓5樓。公司誠(chéng)實(shí)守信,真誠(chéng)為客戶提供服務(wù)。公司主要經(jīng)營(yíng)培養(yǎng)基,菌種,標(biāo)準(zhǔn)品,酶,公司與培養(yǎng)基,菌種,標(biāo)準(zhǔn)品,酶行業(yè)內(nèi)多家研究中心、機(jī)構(gòu)保持合作關(guān)系,共同交流、探討技術(shù)更新。通過(guò)科學(xué)管理、產(chǎn)品研發(fā)來(lái)提高公司競(jìng)爭(zhēng)力。瑞楚生物嚴(yán)格按照行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)研發(fā),產(chǎn)品在按照行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試完成后,通過(guò)質(zhì)檢部門(mén)檢測(cè)后推出。我們通過(guò)全新的管理模式和周到的服務(wù),用心服務(wù)于客戶。在市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)日趨激烈的現(xiàn)在,我們承諾保證培養(yǎng)基,菌種,標(biāo)準(zhǔn)品,酶質(zhì)量和服務(wù),再創(chuàng)佳績(jī)是我們一直的追求,我們真誠(chéng)的為客戶提供真誠(chéng)的服務(wù),歡迎各位新老客戶來(lái)我公司參觀指導(dǎo)。
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