培養基中谷氨酰胺作用及使用方法？幾乎所有的細胞對谷氨酰胺有較高的要求，細胞需要谷氨酰胺合成蛋白質，在缺少谷氨酰胺時，細胞生長不良而死亡。所以，各種培養液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩定，應置-20℃ 冰凍保存，用前加入培養基中。加有谷氨酰胺的液體培養基 4℃冰箱儲存兩周以上時，應重新加入原來量的谷氨酰胺。GlutaMAX-I是什么？培養細胞如何利用GlutaMAX-I？這個二肽有多穩定？GlutaMAX-I 即谷丙氨酸二肽，是一個L-谷氨酰胺的衍生物，其不穩定的 alpha-氨基用L-丙氨酸來保護。一種肽酶逐漸裂解二肽，釋放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I 二肽非常穩定，即使在121磅滅菌20分鐘，GlutaMAX-I 二肽溶液有較小的降解，如果在相同條件下，L-谷氨酰胺幾乎完全降解。培養基根據其組成、用途、酸堿度等不同因素分類，如營養瓊脂、LB培養基、麥康凱培養基等。咖啡酸瓊脂（CAA）

細菌培養基之根瘤菌培養基：葡萄糖10g，磷酸氫二鉀0.5g，碳酸鈣3g，硫酸鎂0.2g，酵母粉0.4瓊脂20g，水1000ml，1%結晶紫溶液1ml。先把瓊脂加水煮沸溶解，然后分別加入其他組分，攪拌使溶解后，分裝，滅菌，備用。放線菌培養基：（1）淀粉硝酸鹽培養基（高氏一號培養基）可溶性淀粉2.0g，硝酸鉀0.1g，磷酸氫二鉀0.05g，氯化鈉0.05g，硫酸鎂0.05g，硫酸亞鐵0.001g，瓊脂2g，水100ml。先把淀粉放在燒杯里，用5ml水調成糊狀后，倒入95ml水，攪勻后加入其他藥品，使它溶解。在燒杯外做好記號，加熱到煮沸時加入瓊脂，不停攪拌，待瓊脂完全溶解后，補足失水。調整pH值到7.2-7.4，分裝后滅菌，備用。緩沖蛋白胨水(BPW) GB/SN有些細胞需要在低溫下培養，這時需要特殊的培養基。

血清的主要成分血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等，這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。血清主要作用：提供基本營養物質：氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等，是細胞生長必須的物質。

以MS培養基母液為基礎，向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100mL，微量元素100×母液20mL，鐵鹽100×母液20mL，維生素100×母液20mL，肌醇200×母液10mL，甘氨酸200×母液10mL，配制得MS培養基后，再加入0.5mg·L-1的BA8mL，0.5mg·L-1的NAA8mL。然后加入實際配制培養基體積約2/3-3/4的蒸餾水，加入40g蔗糖后攪拌使其溶化，用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl調整pH值至5.8-6.0。加入14g瓊脂，將鋁鍋置于電爐上，攪拌加熱使瓊脂完全溶化，然后用蒸餾水定容至終體積2L，繼續加熱幾分鐘使之混合均勻后分裝于三角瓶中。制備培養基需要考慮生長細胞所需的營養、酸堿度和水分含量等因素。

bFGF是一個肝素結合的多膚類絲裂源，普遍分布于各種組織中。bFGF 是一種重要的細胞增殖分化調節劑，可刺激多種細胞的增殖。有研究發現它對滋養細胞也有促增殖作用。bFGF 主要是與細胞膜上FGF受體結合發揮作用，刺激與增殖有關的基因表達。Thomson 等認為，像其他體外培養的人體細胞一樣，hES 細胞要求 bFGF 的存在以促進增殖。同理EGF（上皮生長因子） , 是人體內的一種活性物質，由53個氨基組成的活細胞，藉由刺激表皮細胞生長因子受體之酪氨酸磷酸化，達到修補增生肌膚表層細胞，據說對受傷、受損之表皮肌膚擁有很好的療效，其較大特點是能夠促進細胞的增殖分化。所以加入它們都是促進細胞增殖的。孟德爾-韋伯利法可以計算培養基的可利用能量。改良CCDA培養基基礎添加劑

培養基應適合不同類型細菌的生長，包括需氧菌和厭氧菌。咖啡酸瓊脂（CAA）

天然培養基血清種類：目用于組織培養的血清主要是牛血清，培養某些特殊細胞也用人血清、馬血清等。選擇用牛血清培養細胞的原因：來源充足、制備技術成熟、經過長時間的應用考驗人們對其有比較深入的理解。牛血清對絕大多數哺乳動物細胞都是適合的，但并不排除在培養某種細胞時使用其他動物血清更合適。牛血清是細胞培養中用量比較大的天然培養基，含有豐富的細胞生長必須的營養成份，具有極為重要的功能。牛血清分為小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛；新牛血清取自出生24小時之內的新生牛；小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然，胎牛血清是品質比較高的，因為胎牛還未接觸外界，血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分較少。咖啡酸瓊脂（CAA）

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