動物細胞培養必需的溶液,平衡鹽水(BSS):Hanks 液和Earle液是常用的BSS基礎溶液。PH調整液:3.7%、5.6%、7.4%的NaHCO3溶液、HEPES溶液(二羥乙基哌嗪乙烷磺酸)細胞消化液:胰蛋白酶溶液、EDTA溶液、膠原酶溶液。1)青、鏈霉素,每毫升培養液含100U青霉素和100ug鏈霉素。2)卡那霉素:終濃度為50ug/ml培養液。3)制霉菌素:濃度25U/ml,小瓶分裝,每瓶一次用完。常用的動物血清主要有牛血清和馬血清。牛血清分為胎牛血清和犢牛血清,前者來源少,價格高;后者要求剛產下尚未哺乳的小牛,因為哺乳后的小牛血清中可能含有更復雜的成分。血清中已知的成分主要有蛋白質、氨基酸、葡萄糖等。蛋白質主要是白蛋白和球蛋白。培養基的pH值需要根據不同微生物的生長適應范圍進行調節。溴甲酚紫瓊脂(BPA)
細菌培養基之根瘤菌培養基:葡萄糖10g,磷酸氫二鉀0.5g,碳酸鈣3g,硫酸鎂0.2g,酵母粉0.4瓊脂20g,水1000ml,1%結晶紫溶液1ml。先把瓊脂加水煮沸溶解,然后分別加入其他組分,攪拌使溶解后,分裝,滅菌,備用。放線菌培養基:(1)淀粉硝酸鹽培養基(高氏一號培養基)可溶性淀粉2.0g,硝酸鉀0.1g,磷酸氫二鉀0.05g,氯化鈉0.05g,硫酸鎂0.05g,硫酸亞鐵0.001g,瓊脂2g,水100ml。先把淀粉放在燒杯里,用5ml水調成糊狀后,倒入95ml水,攪勻后加入其他藥品,使它溶解。在燒杯外做好記號,加熱到煮沸時加入瓊脂,不停攪拌,待瓊脂完全溶解后,補足失水。調整pH值到7.2-7.4,分裝后滅菌,備用。氨芐青霉素麥康凱瓊脂基礎培養基也有不同的形態,可以是液體、半固體或固體形式。
上海瑞楚生物科技有限公司小編介紹,厭氧菌培養基(anaerobic media) 供厭氧菌的分離、培養和鑒別用的培養基,稱為厭氧菌培養基。由于厭氧菌自身缺乏有氧代謝所必需的各種酶,如細胞色素和細胞色素氧化酶、過氧化氫酶和過氧化物酶、超氧化歧化酶,所以造成自身代謝的缺陷,無法進行有氧代謝,而無氧酵解所產生的能量又不足,因此厭氧菌在正常的大氣環境下不能生長和生存。為使厭氧菌能正常生長,必須制備營養成分豐富,氧化還原電勢較低,具有特殊生長因子的專門用的培養基。
血清的主要成分血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。血清主要作用:提供基本營養物質:氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質。培養基還可以根據所需生長的微生物類別,加入特定的營養物質,例如血清、血紅蛋白等等。
培養基分類有哪些?營養缺陷型:野生型菌株經過人工誘變或者自然突變失去合成某種營養(氨基酸,維生素,核酸等)的能力,只有在基本培養基中補充所缺乏的營養因子才能生長,稱為營養缺陷型(auxotroph)。營養缺陷型是一種生化突變株,它的出現是由基因突變引起的。遺傳信息的載體是一系列為酶蛋白編碼的核酸系列,如果核酸系列中某堿基發生突變,由該基因所控制的酶合成受阻,該菌株也因此不能合成某種營養因子,使正常代謝失去平衡。細菌類培養基則包括馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基、麥芽瓊脂培養基等等。麥芽浸膏湯
大多數細菌都能在富含有機物的基質中繁殖生長,因此有機培養基是基本的培養基之一。溴甲酚紫瓊脂(BPA)
細菌培養基之牛肉膏瓊脂培養基:牛肉膏0.3g ,蛋白胨1.0g,氯化鈉0.5g,瓊脂1.5g,水100ml在燒杯內加水100ml,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化鈉,用蠟筆在燒杯外作上記號后,放在火上加熱。待燒杯內各組分溶解后,加入瓊脂,不斷攪拌以免粘底。等瓊脂完全溶解后補足失水,用10%鹽酸或10%的氫氧化鈉調整pH值到7.2-7.6,分裝在各個試管里,加棉花塞,用高壓蒸汽滅菌:1.05千克每平方厘米、121攝氏度維持15-30分鐘。牛心培養基:取新鮮牛心(除去脂肪和血管)250克,用刀細細剁成肉末后,加入500毫升蒸餾水和5克蛋白胨。在燒杯上做好記號,煮沸,轉用文火燉2小時。過濾,濾出的肉末干燥處理,濾液pH值調到7.5左右。每支試管內加入10毫升肉湯和少量碎末狀的干牛心,滅菌,備用。溴甲酚紫瓊脂(BPA)
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