培養基按成分分類有哪些?按用途分類:根據用途不同,培養基可分為基礎培養基、營養培養基、增菌培養基、選擇性培養基、鑒別培養基、厭氧菌培養基等。基礎培養基(basic media) 大多數微生物共同需要的營養基礎。某--微生物如有特殊需要,可在此基礎上添加某種成分即可,如蛋白胨水、肉湯培養基、營養瓊脂等。1%蛋白胨水培養基便是一個較簡單的基礎培養基,該基礎培養基本身可供一般細菌增菌培養和靛基質試驗用,若再加入指示劑和糖類,則配成糖發酵培養基,供糖發酵試驗用,成為鑒別培養基;若在1%蛋白胨水中增加氯化鈉用量并將pH提高到8.6左右,則變成堿性蛋白胨水,用于霍亂弧菌的增菌培養,成為專門用的增菌培養基。培養基還可以根據所需生長的微生物類別,加入特定的營養物質,例如血清、血紅蛋白等等。品紅亞硫酸鈉液體培養基 GB
長時間高溫還會引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽離子(特別是鈣、鎂、鐵離子)結合形成難溶性復合物而產生沉淀,因此,在配制用于觀察和定量測定微生物生長狀況的合成培養基時,常需在培養基中加入少量螯合劑,避免培養基中產生沉淀,常用的螯合劑為乙二胺四乙酸(EDTA)。還可以將含鈣、鎂、鐵等離子的成分與磷酸鹽、碳酸鹽分別進行滅菌,然后再混合,避免形成沉淀;高壓蒸汽滅菌后,培養基pH會發生改變(一般使pH降低),可根據所培養微生物的要求,在培養基滅菌前后加以調整。麥康凱(MAC)肉湯(CTMAC肉湯基礎)常見的細菌類培養基包括營養瓊脂培養基、大腸桿菌培養基、金黃色葡萄球菌培養基等等。
動物細胞培養必需的溶液,平衡鹽水(BSS):Hanks 液和Earle液是常用的BSS基礎溶液。PH調整液:3.7%、5.6%、7.4%的NaHCO3溶液、HEPES溶液(二羥乙基哌嗪乙烷磺酸)細胞消化液:胰蛋白酶溶液、EDTA溶液、膠原酶溶液。1)青、鏈霉素,每毫升培養液含100U青霉素和100ug鏈霉素。2)卡那霉素:終濃度為50ug/ml培養液。3)制霉菌素:濃度25U/ml,小瓶分裝,每瓶一次用完。常用的動物血清主要有牛血清和馬血清。牛血清分為胎牛血清和犢牛血清,前者來源少,價格高;后者要求剛產下尚未哺乳的小牛,因為哺乳后的小牛血清中可能含有更復雜的成分。血清中已知的成分主要有蛋白質、氨基酸、葡萄糖等。蛋白質主要是白蛋白和球蛋白。
在培養基中加人某種抑制劑和指示劑,抑制某些細菌生長,促進目的菌的繁殖,并使所生長的細菌菌落具有一定特征,以助鑒別挑選,這類培養基稱為選擇性鑒別培養基。如SS瓊脂,在該培養基配方中含有乳糖(反應底物)、中性紅和檸檬酸鐵銨(指示劑)、燦爛綠及膽鹽等(抑菌劑)。燦爛綠和膽鹽等抑菌劑能抑制革蘭氏陽性菌及部分大腸埃希菌的生長,而對沙門菌及志賀菌基本無影響,而且大腸埃希菌能發酵乳糖產酸,使菌落變紅色,沙門菌和志賀菌不發酵乳糖,其菌落為無色。如細菌產生硫化氫,則與檸檬酸鐵銨反應生成硫化亞鐵沉淀,菌落中心呈黑色或褐色。以此達到鑒別的目的。細胞類培養基則可分為無血清培養基和含血清培養基兩類。
半固體培養基(half-solid medium) 在液體培養基中加人0.2%~0.5%的瓊脂粉,加熱溶解后冷卻即成,以倒置不流動的較軟狀態為宜,一般供細菌動力試驗、菌種傳代、保存和儲運標本之用。固體培養基(solid medium) 培養基中含有足量的凝固劑(瓊脂粉>0.5%),在常溫下能保持固體狀態。此類培養基大都用于微生物的分離、純化、藥敏試驗及菌苗制造。如營養瓊脂、營養斜面、SS瓊脂、TCBS瓊脂等。此外,還有一些特殊用途的培養基,如用血清或雞蛋做凝固劑配成的呂氏血清斜面培養基、雞蛋斜面培養基等。培養基的傳遞需要在制備和使用期間保持良好的無菌技術,避免細菌交叉污染。乳糖蛋白胨半固體培養基
大多數細菌都能在富含有機物的基質中繁殖生長,因此有機培養基是基本的培養基之一。品紅亞硫酸鈉液體培養基 GB
細胞培養過程中,細胞培養基是不可或缺的,細胞培養基既是培養細胞中供給細胞營養和促使細胞生殖增殖的基礎物質,也是培養細胞生長和繁殖的生存環境。通常細胞體外培養時需要加入血清,以維持細胞的生長和存活。而除了血清之外,部分細胞在培養過程中需要添加胰島素和β-巰基乙醇(β-mercaptoethanol)等成分來維持細胞狀態。MCF-7和NIH:OVCAR-3等細胞需要額外添加胰島素,而Thp-1和MC3T3-E1 subclone 14等細胞則需要添加β-巰基乙醇,不同細胞加入量會有差異,需根據細胞類型判斷。品紅亞硫酸鈉液體培養基 GB
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