全波長微量分光光度計是一種用于微量樣品檢測的儀器,能夠快速準確地測量核酸、蛋白質、細胞溶液等的濃度。其檢測原理是通過氙閃光燈等光源發出的全波長光線照射樣品,然后利用線性CCD陣列等檢測器接收透過樣品或被樣品反射的光信號,并將其轉化為電信號進行分析,從而得到樣品在不同波長下的吸光度等參數,進而確定樣品的濃度等信息。微量樣品檢測:需 0.5 至 2μl 的樣品量,減少了樣品消耗,對于珍貴樣品的檢測具有重要意義。全波長檢測范圍:通常檢測波長范圍在 200~800nm 或更寬,可滿足對核酸、蛋白質等不同物質的檢測需求,例如核酸檢測常用 260nm 波長,蛋白檢測常用 280nm 波長等。檢測速度快:無需預熱,每個樣品的測量可在很短時間內完成,一般在 5 秒左右即可顯示結果。操作簡便:直接將樣品點于加樣板上,無需比色皿或其他樣品定位裝置,也無需稀釋樣品(除非樣品濃度過高)。測量結束后,可選擇擦去樣品或用移液器回收。長壽命光源:如氙閃光燈,使用壽命較長。智能節能:智能識別用戶使用情況,若 5 分鐘內無操作將自動關閉光源,延長使用壽命,待用戶按下檢測按鈕時自動開啟。數據處理方便:軟件界面友好,操作簡單,結果可直接導出,便于數據保存、查看和輸出。儀器校準:定期進行儀器校準,確保測量結果的準確性和可靠性。南京微量微量分光光度計檢測
樣品用量與質量嚴格控制樣品體積(1-2μL,過多易溢出污染儀器,過少可能形成不完整液柱,導致結果偏差)。避免樣品中含氣泡、油脂、核酸酶等,否則會干擾檢測或損壞探頭。校準與空白對照每次實驗前必須用與樣品溶解相同的緩沖液做空白校準(如 RNA 用 RNase-free 水,DNA 用 TE 緩沖液),否則會導致濃度計算誤差。定期用標準品(如已知濃度的 DNA 標準溶液)驗證儀器準確性(建議每 3-6 個月一次)。純度比值的正確解讀A260/A280 和 A260/A230 為 “相對純度指標”,不能完全替代瓊脂糖凝膠電泳(檢測核酸完整性)或 SDS-PAGE(檢測蛋白質污染)。高濃度樣品(如 > 500ng/μL)的比值可能不準確,建議稀釋后重新檢測。探頭維護探頭是部件,需避免刮擦、碰撞,禁止用硬物(如棉簽)擦拭,可用清潔紙或鏡頭紙輕輕擦拭。若檢測含強腐蝕性或高鹽樣品后,需立即用蒸餾水清潔探頭,防止腐蝕。數據重復性驗證對重要樣品建議重復檢測 2-3 次(每次更換新的樣品液滴),取平均值(偏差應 < 5%),避次操作誤差。南京微量微量分光光度計檢測食品檢測:檢測食品中的營養成分、添加劑、污染物等,確保食品安全。
核酸定量與純度分析測定基因組 DNA、質粒 DNA、總 RNA、mRNA 等的濃度(ng/μL),快速判斷樣品是否適合后續實驗(如 PCR、測序、轉染等)。通過 A260/A280、A260/A230 比值評估純度:若 A260/A280 偏低,可能含蛋白質污染;A260/A230 偏低,可能含酚、鹽或糖類雜質。蛋白質定量直接測定純蛋白溶液的濃度(基于 280nm 吸光度,需已知蛋白質的消光系數)。輔助驗證其他定量方法(如 BCA 法、Bradford 法)的結果。細胞與微生物檢測測定細菌、酵母等微生物的培養液濃度(OD600),用于生長曲線繪制或發酵過程監測。快速評估細胞懸液的密度(需配合適當的稀釋)。其他應用檢測染料標記的樣品(如熒光探針標記的核酸)。分析小分子化合物、藥物等在特定波長的吸收特性。
微生物檢測中的特殊考量波長選擇的依據OD600(600nm):**常用波長,因該波長下微生物細胞的吸光度主要由細胞本身的散射和吸收引起,受培養基成分(如蛋白、核酸)干擾較小,適用于細菌、酵母等懸浮細胞的濃度測定。紫外波長(如 260nm、280nm):用于檢測微生物代謝產物(如核酸、蛋白),或評估樣本純度(如核酸提取液的 260/280nm 比值)。其他特征波長:如檢測微生物色素(如類胡蘿卜素在 450nm 的吸收)、酶活性(如 NADH 在 340nm 的吸光度變化)??煽焖贉y定食品添加劑、營養素、有害物質的含量,確保食品符合安全標準。
微量分光光度計利用上述原理進行工作。其重要部件包括光源、單色器、檢測器和數據處理系統。光源:發射一束光線,為測量提供光源。單色器:將光源發出的光線分解為單一波長的光線,以便測量特定波長下的吸光度。檢測器:將透過樣品的光線轉換為電信號,以便進行后續的數據處理。數據處理系統:接收檢測器輸出的電信號,根據朗伯-比爾定律計算出樣品的吸光度,并進一步推算出樣品的濃度。在實際操作中,將待測樣品置于樣品室中,光源發出的光線經過單色器后得到單一波長的光線,然后透過樣品進入檢測器。檢測器將光信號轉換為電信號,并通過數據處理系統計算出樣品的吸光度。根據吸光度與濃度的關系,可以得出樣品的濃度。高分辨率與高靈敏度:微量分光光度計能夠精確測量微弱的光信號變化,對低濃度樣品具有高度的敏感性。比色皿微量分光光度計價格實惠
將待測樣品制備成適合檢測的形式,如溶液、薄膜等。對于生物樣品,可能需要進行提取、純化和標記處理步驟。南京微量微量分光光度計檢測
微生物微量分光光度計的工作原理基于朗伯 - 比爾定律(Lambert-Beer Law),通過測量特定波長光穿過微生物樣本時的吸光度,來定量分析樣本中的微生物濃度、成分或生理狀態。1.定律基本內容當一束單色光穿過均勻透明的溶液時,光的吸光度(A)與溶液中吸光物質的濃度(c)和光通過的路徑長度(l)成正比,公式為:A=ε×c×l其中,ε為吸光系數(與物質特性和波長相關)。2.在微生物檢測中的具象化微生物細胞作為吸光物質:微生物細胞(如細菌、***)在懸浮液中會對特定波長的光產生吸收或散射,導致透射光強度減弱。吸光度與細胞濃度的關聯:在一定濃度范圍內,微生物懸液的吸光度(如OD600)與細胞數量呈線性關系,因此可通過測量吸光度快速估算細胞密度。南京微量微量分光光度計檢測