芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測SiMoA通過將單個酶產(chǎn)生的熒光團限制在極小范圍內(nèi),從而能夠檢測到非常低濃度的酶標記物體積(~50fL),導(dǎo)致熒光產(chǎn)物分子的局部高濃度。為了在免疫測定中實現(xiàn)這種定位,在第二步中,將珠子加載到一個陣列為離散的微升大小的孔(圖1C)。本研究中使用的2毫米寬陣列有~50,000個孔,孔徑為μm,孔深為μm。加載后的陣列在含有熒光酶底物液滴的情況下,用橡膠密封圈密封。Rissin等人,第3頁將每個微球隔離在飛升反應(yīng)室中。具有單一酶的微球標記的免疫復(fù)合物在50飛升的反應(yīng)室中產(chǎn)生局部高濃度的熒光產(chǎn)物(圖1D)。通過使用標準顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)獲取陣列的時間變化熒光圖像,可以區(qū)分與單一酶分子相關(guān)的微球(“開啟”孔)和不與酶相關(guān)的微球(“關(guān)閉”孔);補充圖1顯示了“開啟”和“關(guān)閉”孔的熒光直方圖。成像陣列可以成千上萬的單個免疫復(fù)合物同時檢測。通過測定供試品中的蛋白質(zhì)濃度來確定計算含有珠子和熒光產(chǎn)物的孔數(shù)相對于含有珠子的孔數(shù)(圖1D)。使用SiMoA,濃度是因此,我們稱SiMoA應(yīng)用于檢測單個免疫復(fù)合物為數(shù)字ELISA。 具有以下特點: 多重、超敏、微量、極速 靈活、開放!單分子檢測數(shù)字ELISA試劑開放
創(chuàng)新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA
我公司推出的數(shù)字化高靈敏ELISA芯片檢測產(chǎn)品應(yīng)用場景:適合生物實驗室、醫(yī)學(xué)實驗室、科研市場、產(chǎn)品預(yù)研、產(chǎn)品開發(fā)、ELISA檢測、動物病情檢測等各種應(yīng)用場景應(yīng)用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產(chǎn)品。
用DNA捕獲探針(5‘-NH2/C12-GTTGTCAAGATGCTA)功能化的微球CCGTTCAGAG-3‘)是按照制造商的說明制備的。這些珠子與生物素化互補DNA的1μM(5’-生物素-CTCT)孵育。在含有0.5MNaCl和0.01%Tween-20的TE緩沖液中過夜(16h)孵育GAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘。孵育后,用PBS洗滌珠子三次含0.1%Tween-20的緩沖液。將珠子樣品分裝至微孔板中100μL中每孔給予400,000個微球。從微孔板孔中吸取緩沖液,將微球重懸后與不同濃度的ofSβG孵育。 科研場景用數(shù)字ELISA使用速度芯棄疾JX-8B簡易版單分子ELISA檢測產(chǎn)品,極速檢測,檢測步驟只需要3次操作,遠遠快于常規(guī)ELISA;
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根據(jù)目標蛋白的抗體制備了功能化的微球生產(chǎn)商說明。含有目標蛋白的100-μL測試溶液與200,000個磁珠懸浮液孵育2小時至23°C。然后將磁珠分離并用PBS和0.1%Tween-20洗滌三次。磁珠重新懸浮后與含有檢測抗體(通常約為1nM)的溶液孵育45分鐘。在23°C下最小值。然后將珠子分別用PBS和0.1%洗滌三次。Tween-20。將珠子與含有SβG(1–50pM)的溶液在23°C孵育30分鐘,然后分離并在PBSand0.1%Tween-20中洗滌六次。隨后將珠子重懸于10μLofPBS中,并加載到飛升液位陣列中。整個實驗的總時間約為~6小時。
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品
每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測
數(shù)字ELISA測量蛋白質(zhì)濃度遠低于傳統(tǒng)ELISA的能力源于兩種效應(yīng):1)SiMoA對酶標記的高度敏感性;以及2)通過數(shù)字化蛋白質(zhì)檢測可以實現(xiàn)的低背景信號。任何免疫測定的靈敏度由其靈敏度決定。檢測技術(shù)到標簽,抗體親和力,試驗背景,以及背景測量值的變異(%CV)27.SiMoA對酶非常敏感標簽(圖2)為在數(shù)字ELISA中檢測亞飛摩爾濃度的標記蛋白提供了基礎(chǔ)。也就是說,對于給定親和力的抗體,其靈敏度為免疫測定將由測定背景決定,SiMoA的高標記靈敏度有助于降低這種背景。對照實驗表明,數(shù)字ELISA的背景來自于檢測抗體和酶的非特異性結(jié)合(NSB)與捕獲珠表面結(jié)合(補充表2)。AsSiMoA相比傳統(tǒng)檢測方法具有更高的標記靈敏度,明顯減少了檢測抗體(~1nM)和酶標記物(1–50pM)的需要,以檢測結(jié)合事件,與傳統(tǒng)方法相比(標記試劑濃度~10nM)。降低的標記物濃度減少了NSB到捕獲表面,從而導(dǎo)致背景信號明顯降低。 數(shù)字化ELISA芯片,幫您數(shù)字化高靈敏檢測,且微量樣本多重指標檢測;
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品是什么?怎么做到單分子技術(shù)的低成本實現(xiàn)?
我們?yōu)槭裁茨茏龅剑慨a(chǎn)品特有原理同somoa技術(shù)
使用創(chuàng)新的fg級超敏免疫檢測simoa單分子產(chǎn)品原理;只強度變化的單個信號二維離散化、陣列單分散排布,形成數(shù)萬個熒光信號;將傳統(tǒng)的模擬信號轉(zhuǎn)化為新型的數(shù)字化信號;創(chuàng)新型原理,有效提高檢測靈敏度,可達fg/aM級!
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品是,先進新型的單分子檢測方法的普及版;
每個生物/醫(yī)學(xué)實驗室都用得起的單分子免疫檢測使用現(xiàn)有平臺就能做的單分子免疫檢測;
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品,具有以下特點:多重、超敏微量、極速靈活、開放 芯棄疾JX-8B單分子ELISA檢測產(chǎn)品,少至可以進行8孔、4孔的靈活檢測。單分子檢測數(shù)字ELISA試劑開放
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,微量檢測,使用微量樣本就能測試;單分子檢測數(shù)字ELISA試劑開放
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA高敏檢測產(chǎn)品;將傳統(tǒng)的模擬信號轉(zhuǎn)化為新型的數(shù)字化信號;創(chuàng)新型原理,有效提高檢測靈敏度,可達fg/aM級!
陣列芯片原理:從15μLof基質(zhì)中的500,000個珠子開始。結(jié)果表明,陣列圖像的定量分析大約一半的孔在珠子沉降幾分鐘后被占據(jù)。對于SimoaHD-1分析儀,沉降時間減少到90秒,分布在三個儀器處理周期之間。隨著珠子重新沉降到陣列中,儀器對其他操作(密封和成像)進行索引,這些操作已經(jīng)加載到陣列上。通常,會檢測25,000-50,000個珠子。由于Simoa中的測量單位(AEB)是一個比率,一定珠裝載量的差異不影響數(shù)據(jù)質(zhì)量或在大多的范圍內(nèi)保持精度,前提是存在足夠的珠子數(shù)量以保持在泊松噪聲水平之上。22數(shù)據(jù)質(zhì)量會受到影響,當泊松噪聲主導(dǎo)測量誤差時。這發(fā)生在與背景相關(guān)的正井數(shù)量降至約50個珠子以下時,此時泊松噪聲明顯影響測量的變異系數(shù)(CV)。
單分子檢測數(shù)字ELISA試劑開放