RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國(guó)紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀(jì)念研究所（RoswellParkMemorialInstitute,RPMI）開發(fā)出來(lái)的，RPMI是該研究所開發(fā)的一類細(xì)胞培養(yǎng)基，1640是培養(yǎng)基代號(hào)。RPMI-1640是改進(jìn)型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基，使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)，與大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基**初是為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)專門設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于各種正常細(xì)胞和*細(xì)胞的培養(yǎng)，包括HeLa細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、PC12細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和*細(xì)胞，是使用**為***的培養(yǎng)基之一。RPMIRPMI1640培養(yǎng)基相比其他培養(yǎng)基之所以具有獨(dú)特的效果，是因?yàn)槠渲泻羞€原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。RPMI1640培養(yǎng)基含有生物素、維生素B12以及PABA，這些成分是Eagle’sMEM和DMEM所不具備的。針對(duì)***的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用，我們提供多種組分的RPMI1640改良培養(yǎng)基。RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基L-谷氨酰胺（Glutamine）是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營(yíng)養(yǎng)元素，但其在溶液中不穩(wěn)定，會(huì)自發(fā)降解，不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基，可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量，在使用時(shí)添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長(zhǎng)。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。M199有兩種平衡鹽成分，Earle’s鹽成分常用于CO2環(huán)境，Hank’s鹽成分用于非CO2的環(huán)境。上海正規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)基

DMEM 培養(yǎng)基在組織工程領(lǐng)域也展現(xiàn)出廣闊的應(yīng)用前景。在構(gòu)建組織工程支架時(shí)，可將細(xì)胞與 DMEM 培養(yǎng)基混合后接種于支架材料上，DMEM 培養(yǎng)基為細(xì)胞提供生長(zhǎng)所需營(yíng)養(yǎng)，促使細(xì)胞在支架上黏附、增殖并分化，逐漸形成具有特定功能的組織。例如，在骨組織工程研究中，利用 DMEM 培養(yǎng)基培養(yǎng)成骨細(xì)胞，將其接種到生物可降解支架上，有望構(gòu)建出具有生物活性的人工骨組織，為骨缺損修復(fù)提供新的***策略，為組織工程技術(shù)的臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。保障細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)基廠家Dulbecco’s 改良培養(yǎng)基增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。

生物藥物生產(chǎn)過程中，DMEM 培養(yǎng)基扮演著關(guān)鍵角色。在單克隆抗體生產(chǎn)環(huán)節(jié)，科研人員利用 DMEM 培養(yǎng)基培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞，使其大量增殖并分泌高純度的單克隆抗體。在疫苗生產(chǎn)方面，DMEM 培養(yǎng)基用于培養(yǎng)病毒抗原，如流感疫苗生產(chǎn)中，通過在 DMEM 培養(yǎng)基中培養(yǎng)流感病毒，獲取足夠的病毒抗原，進(jìn)而制備出安全有效的流感疫苗。此外，一些重組蛋白藥物的生產(chǎn)也依賴 DMEM 培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞，這些細(xì)胞在培養(yǎng)基提供的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境下，高效表達(dá)出具有***價(jià)值的重組蛋白，為患者帶來(lái)希望。

在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)里，DMEM 培養(yǎng)基的使用過程需嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范。收到培養(yǎng)基后，應(yīng)及時(shí)存放于 2-8°C 的環(huán)境中，低溫可有效減緩培養(yǎng)基內(nèi)成分的降解速度，確保其營(yíng)養(yǎng)成分的穩(wěn)定性。在使用前，需將培養(yǎng)基預(yù)熱至 37°C，模擬人體體溫環(huán)境，讓細(xì)胞在適宜溫度下開啟生長(zhǎng)旅程。同時(shí)，由于 DMEM 培養(yǎng)基多采用碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)，需將培養(yǎng)環(huán)境的 CO?濃度維持在 5 - 10%，以此精細(xì)調(diào)控培養(yǎng)基的 pH 值處于 7.2 - 7.4 的生理適宜區(qū)間，為細(xì)胞打造穩(wěn)定且舒適的 “居住空間”，促進(jìn)細(xì)胞健康生長(zhǎng)。DMEM/F12培養(yǎng)基是在DMEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，添加F12培養(yǎng)基中更為豐富的營(yíng)養(yǎng)成分。

    Dulbecco’s改良培養(yǎng)基–DMEM（Dulbecco’sModifiedEagleMedium）是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的，與MEM培養(yǎng)基相比，氨基酸的含量增加了2倍，維生素的含量增加了4倍，同時(shí)還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。DMEM培養(yǎng)基初設(shè)計(jì)葡萄糖含量為1000mg/L（低糖型），后來(lái)又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L（高糖型），現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng)。HEPES是一種優(yōu)良的生物緩沖劑，對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性作用，添加HEPES的培養(yǎng)基能夠較長(zhǎng)時(shí)間保持恒定的PH范圍，可以有效的防止培養(yǎng)液PH波動(dòng)較大對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)產(chǎn)生不利的影響。可用于無(wú)CO2培養(yǎng)箱。酚紅在培養(yǎng)基中被用來(lái)作為PH值的指示劑，用以持續(xù)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)液的酸堿度，在低PH值時(shí)酚紅使培養(yǎng)液呈黃色，而較高的PH值時(shí)使培養(yǎng)液呈紫色，PH值～，適合細(xì)胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些缺點(diǎn)，研究表明酚紅可以模擬固醇類***（特別是雌***）的作用，因此在用到雌***敏感的細(xì)胞時(shí)（如乳腺組織），較好使用不含酚紅的培養(yǎng)基。酚紅會(huì)干擾流式細(xì)胞分析時(shí)候的檢測(cè)。此外，一些無(wú)血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會(huì)干擾鈉-鉀平衡。 DMEM 培養(yǎng)基擁有多種配方，低葡萄糖濃度（1g/L）的配方，溫柔呵護(hù)對(duì)高糖敏感的細(xì)胞。吉林細(xì)胞培養(yǎng)基批發(fā)廠

高糖 DMEM 適合生長(zhǎng)快、粘附低的細(xì)胞，如腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng) 。上海正規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)基

    無(wú)血清培養(yǎng)基中通常需要添加一些額外的組分，才能幫助細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，包括以下幾大類物質(zhì)：1）促貼壁物質(zhì)：一般為細(xì)胞外基質(zhì)，如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細(xì)胞功能的分化因子，對(duì)許多細(xì)胞的繁殖和分化，起著重要作用。纖連蛋白主要促進(jìn)來(lái)自中胚層細(xì)胞的貼壁與分化，這些細(xì)胞包括成纖維細(xì)胞、肉瘤細(xì)胞、粒細(xì)胞、腎上皮細(xì)胞、腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞、CHO細(xì)胞、成肌細(xì)胞等。2）促生長(zhǎng)因子：針對(duì)不同細(xì)胞添加不同的生長(zhǎng)因子。也是刺激細(xì)胞生長(zhǎng)、維持細(xì)胞功能的重要物質(zhì)，有些是許多細(xì)胞必不可少的，如胰島素。3）酶抑制劑：培養(yǎng)貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞，需要用胰酶消化傳代，在無(wú)血清培養(yǎng)基中需含酶抑制劑，以終止酶的消化作用，達(dá)到保護(hù)細(xì)胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制劑。4）結(jié)合蛋白和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白：常見如轉(zhuǎn)鐵蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比較大，可增加培養(yǎng)基的粘度，保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷。許多旋轉(zhuǎn)式培養(yǎng)的無(wú)血清培養(yǎng)基都含有牛血清白蛋白。5）微量元素：硒是常見的。上海正規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)基

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