2025-05-10

1. 樣本準備 細胞收集：離心培養的細胞或組織樣本，去除培養基或雜質。 洗滌：用緩沖液（如PBS）清洗細胞，去除殘留的培養基或代謝廢物。 預處理：某些樣本需預冷（如低溫保存的細胞）或預消化（如組織塊需酶解）。 2. 選擇破碎方法 機械破碎法： 勻漿法：使用勻漿器（如Dounce勻漿器）或高壓勻漿機（如French Press），適用于動植物組織或微生物。 超聲破碎：利用超聲波的空化效應破碎細胞，適合小規模樣本（需冰浴防止過熱）。 研磨法：使用液氮冷凍后研磨（適用于植物細胞或細菌）。 珠磨法：加入玻璃珠或鋼珠，通過高速振蕩破碎細胞（如酵母或細菌）。 非機械破碎法： 化學裂解：使用去垢劑（如SDS、Triton X-100）溶解細胞膜。 酶解法：用溶菌酶（細菌）、纖維素酶（植物）或蛋白酶K（動物）降解細胞壁/膜。 滲透壓法：低滲溶液（如純水）使細胞膨脹破裂（適用于紅細胞等脆弱細胞）。 凍融法：反復冷凍（液氮）和解凍（37℃）破壞細胞結構。 3. 破碎條件優化 根據細胞類型調整破碎強度和時間（如革蘭氏陽性菌需更劇烈處理）。 保持低溫（冰浴）以防止蛋白降解或酶失活。 添加蛋白酶/核酸酶抑制劑（如PMSF、EDTA）保護目標成分。

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