pA-Tn5轉座酶是一種經過改造的高活性Tn5轉座酶，與ProteinA融合，形成一種新型融合酶，應用于CUT&Tag技術中，用于研究蛋白質與基因組DNA的相互作用。這種融合酶具備以下特點：1.**高活性**：pA-Tn5轉座酶是超高活性的突變形式，體外轉座效率比野生型高1000倍。2.**ProteinA融合**：pA-Tn5轉座酶的N端結構域為ProteinA的一部分，可以與免疫球蛋白的Fc區相互作用，特別是與大多數哺乳動物的IgG結合。3.**Tn5轉座酶活性**：C端結構域為Tn5轉座酶，能夠特異性識別轉座子兩端反向重復的ME序列(MosaicEnd)，并在形成轉座復合體后隨機插入靶DNA中。4.**應用廣**：適用于CUT&Tag技術、高通量測序建庫、ATAC-seq等，特別適用于早期胚胎發育、干細胞、以及表觀遺傳學等研究領域。5.**操作簡便**：pA-Tn5轉座酶的使用簡化了實驗步驟，可以在一步反應中實現DNA片段化和接頭連接，從細胞到二代測序文庫的轉化過程需9小時。6.**低細胞投入量**：CUT&Tag技術允許從低至60個細胞的樣本中獲得結果，甚至可以應用于單細胞水平的研究。7.**高質量結果**：pA-Tn5轉座酶的使用可以保證DNA片段化，同時獲得的蛋白純度高、核酸殘留低。FnCas12a的C端融合了核定位信號(NLS)，有助于FnCas12a進入細胞后定位至細胞核，提高基因編輯效率。Recombinant Rat Prolactin

DNA瓊脂糖凝膠電泳是一種常用的分子生物學技術，用于分離、鑒定和定量DNA片段。以下是關于DNA瓊脂糖凝膠電泳的一些關鍵點：1.**原理**：-利用瓊脂糖凝膠作為介質，DNA片段在電場作用下根據其大小和電荷差異進行分離。較小的DNA片段遷移速度快，而較大的片段遷移速度慢。2.**瓊脂糖**：-一種由瓊脂糖粉末和緩沖液（如TAE或TBE）混合制成的凝膠。瓊脂糖濃度通常在0.7%到2%之間，濃度越高，分辨率越高，但凝膠孔隙越小，遷移速度越慢。3.**樣品準備**：-DNA樣品通常需要在加載前進行適當的處理，如純化、稀釋，有時還需添加樣品緩沖液以保證樣品在電泳過程中的穩定性。4.**加載樣品**：-使用微量移液管將樣品和加載緩沖液（通常含有追蹤染料，如溴酚藍）混合后，小心地加載到凝膠孔中。5.**電泳**：-將凝膠置于電泳槽中，連接電源，施加恒定電壓進行電泳。電壓和時間根據凝膠濃度和所需分辨率進行調整。6.**染色**：-電泳完成后，為了可視化DNA條帶，通常使用熒光染料如EB（溴化乙錠）或SYBRGreen進行染色。染色后的凝膠在紫外光下觀察，DNA條帶會發出熒光。7.**分析**：-通過比較DNA條帶的位置和已知大小的DNA標準品（DNAladder），可以估計DNA片段的大小。

磁珠法DNA凝膠回收試劑盒是一種用于從DNA瓊脂糖凝膠中快速、高效地回收DNA片段的實驗工具。它通常包含特異性吸附核酸分子的納米磁珠和相應的緩沖液系統，能夠去除雜質，得到高質量的DNA回收產物。這種試劑盒適用于從TAE和TBE瓊脂糖凝膠中回收大小在100bp到30kb之間的DNA片段，回收效率通常可達70%左右。使用磁珠法DNA凝膠回收試劑盒的主要優勢包括：1.操作簡便快速，整個回收過程大約只需30分鐘。2.無需離心，方便實現高通量和自動化的DNA回收。3.與柱式法相比，磁珠法對于長片段DNA的回收效率更高，可高出約20%。4.純化得到的DNA可以直接用于酶切、連接、測序等后續分子生物學實驗。磁珠法的操作過程通常包括以下步驟：1.將瓊脂糖凝膠在融膠液中迅速融解，使DNA充分釋放。2.DNA與磁珠特異性結合，通過磁分離快速高效地分離磁珠與溶液。3.經過洗滌去除雜質。4.使用洗脫液將DNA從磁珠上洗脫，獲得高純度的DNA樣品。此外，一些試劑盒的說明書還會提供具體的操作步驟和所需材料的清單，包括磁珠、融膠液、洗滌液、洗脫液等組分，以及可能需要自備的無水乙醇和磁分離裝置。在使用過程中，需要注意產品的保存條件和有效期，以及操作時的個人安全防護措施。

PCR產物直接進行電泳分析通常涉及以下步驟：PCR擴增：首先使用PCR Master Mix和特定的引物對目標DNA片段進行擴增。PCR產物的準備：如果使用的是含有預混凝膠加載染料的PCR Master Mix（如某些Blood Direct PCR Master Mix），則PCR產物在擴增后已經含有了適合電泳的染料。如果沒有使用含染料的Master Mix，則需要在PCR反應完成后向產物中添加適量的凝膠加載染料。電泳槽的準備：清潔電泳槽，確保沒有灰塵或殘留物。安裝電泳板和梳子，注意密封以防緩沖液泄漏。灌注緩沖液：向電泳槽中灌注適量的電泳緩沖液，常用的緩沖液有1X TAE或1X TBE。PCR產物的加載：將PCR產物輕輕混合均勻，避免氣泡的產生。使用移液槍或微量移液管將PCR產物加入到凝膠孔中。如果PCR Master Mix中已含有染料，通常不需要額外添加。電泳條件的設置：根據PCR產物的大小和凝膠的濃度選擇合適的電壓和時間進行電泳。例如，較小的DNA片段可能需要較高的電壓，而較大的片段則可能需要較低的電壓和更長的時間。在目標蛋白的C末端添加His標簽和Avi標簽。有助于通過親和層析進行蛋白純化，而Avi標簽則可以用于生物素。

Benzonase核酸酶殘留檢測試劑盒通過以下方式實現高靈敏性：1.**熒光探針技術**：試劑盒采用熒光標記的DNA探針，這種探針在沒有Benzonase核酸酶的樣品中穩定存在且不產生熒光信號。當樣品中含有核酸酶殘留時，核酸酶會切割熒光標記的DNA探針，導致熒光信號的增強。這種變化可以用來定量分析Benzonase的殘留量，實現高靈敏度檢測。2.**熒光共振能量轉移(FRET)**：該技術利用了供體(Donor)和受體(Acceptor)熒光基團間的相互作用。在未切割狀態下，供體的熒光被受體淬滅，而一旦DNA探針被Benzonase切割，供體熒光基團與受體分離，熒光信號增強，從而實現高靈敏度的檢測。3.**優化的底物探針**：試劑盒中的Benzonase底物是一種合成的DNA寡核苷酸探針，其一端具有VIC熒光基團，另一端具有BHQ1淬滅基團。這種設計使得在底物被切割后，VIC熒光不再被BHQ1淬滅，從而可以非常靈敏地檢測到Benzonase核酸酶活性。4.**高靈敏度的檢測范圍**：試劑盒能夠檢測到低達約0.002U(約0.003ng)的Benzonase或BeyoZonase，樣品中的Benzonase濃度約為0.0002U/μl或0.3pg/μl，這遠低于常規同類產品的檢測限。與其他Cas12蛋白相比，FnCas12a蛋白的分子量較小，大約在400-700個氨基酸之間。Carcinoembryonic Antigen (CEA)

FnCas12a的雙鏈或單鏈DNA靶標都能激發其反式剪切活性，即在形成三元復合物后，針對非特異序列ssDNA的剪切。Recombinant Rat Prolactin

熒光探針法是一種利用熒光標記的分子（即熒光探針）來檢測和定量目標分子的方法。這種方法廣泛應用于生物化學、分子生物學和醫學診斷等領域。以下是熒光探針法的一些關鍵特點和工作原理：1.**熒光標記**：熒光探針是一類特殊的分子，它們含有可以發出熒光的化學基團（熒光團）。這些熒光團在受到特定波長的光激發時，會發出特定波長的光。2.**特異性結合**：熒光探針通常設計成能夠特異性地與目標分子結合，如DNA、RNA、蛋白質或其他小分子。這種結合通常是通過分子間的互補性，如氫鍵、疏水作用或離子鍵等實現的。3.**信號變化**：熒光探針在結合目標分子前后，其熒光特性（如熒光強度、波長、壽命等）會發生改變。這種變化可以是增強或減弱，取決于探針的設計和環境條件。4.**檢測原理**：-在**熒光共振能量轉移（FRET）**中，兩個不同的熒光團被設計成靠近，使得一個熒光團（供體）的能量可以非放射性地轉移到另一個熒光團（受體）。當供體和受體之間的距離改變（如由于目標分子的結合）時，FRET效率會改變，從而影響熒光信號。-在**熒光增強或減弱**中，探針的熒光特性直接受到其與目標分子結合的影響。例如，某些探針在結合DNA后，其熒光強度會增強。Recombinant Rat Prolactin