NLS-Cas9-EGFPNuclease是一種融合蛋白,由Cas9核酸酶、核定位信號(NLS)和EGFP(綠色熒光蛋白)組成。這種融合蛋白的特點和科研應用如下:**特點:**1.**無DNA污染**:系統不添加外部DNA,降低了外源DNA污染的風險。2.**高切割效率**:NLS確保Cas9蛋白能夠高效地進入細胞核,從而提高DNA切割效率。3.**低脫靶效應**:由于Cas9核酸酶的瞬時表達,減少了在非目標位點切割的可能性。4.**節省時間**:與需要轉錄和翻譯的mRNA或質粒系統相比,NLS-Cas9-EGFPNuclease可以直接進入細胞核,無需等待轉錄和翻譯過程。5.**EGFP標簽**:EGFP作為報告基因,可用于追蹤或分選轉染細胞,便于通過熒光激起細胞分選(FACS)富集所需基因組編輯的細胞群,減少單細胞克隆和基因分型的勞動和成本。**科研應用:**1.**體外DNA切割篩選**:可以用于篩選高效和特異性靶向的gRNA,通過體外DNA切割實驗來驗證gRNA的效率和特異性。2.**體內基因編輯**:與特定的gRNA結合后,可以通過電穿孔或注射的方式進行體內基因編輯。3.**細胞追蹤和分選**:利用EGFP熒光標記,可以追蹤轉染細胞并進行分選,這對于研究基因編輯后的細胞群體特別有用。
重組人血清白蛋白(rHSA)是一種重要的蛋白質,廣泛應用于生物醫學領域。植物表達的細胞培養級重組人血清白蛋白(rHSA)具有多項特點和科研應用價值:1.**高純度和安全性**:植物源重組人血清白蛋白(rHSA)通過基因工程技術在植物如水稻中表達,避免了動物源成分和血源性的病毒污染的風險,提供了一種更安全、更純凈的蛋白質來源。2.**批次穩定性**:與來源于動物的血清白蛋白相比,植物表達的rHSA提供了更高的批次間一致性和穩定性,這對于科研和工業應用中的重復性和可靠性至關重要。3.**多功能性**:rHSA在細胞培養中可以作為重要的添加成分,有助于細胞生長和維持培養環境的穩定性。它還可以作為藥物載體,疫苗保護劑、細胞凍存保護劑和醫療器械包埋劑等。4.**生物相容性**:由于rHSA的化學性質與天然HSA非常接近,它在生物醫藥生產中具有很高的生物相容性,可以用于多種藥物的配方和醫療設備。5.**科研應用**:rHSA在科研中可用于細胞培養、藥物載體研究、疫苗開發、組織工程和再生醫學等領域。6.**生產規模**:植物表達系統具有大規模生產重組蛋白的潛力,這對于滿足全球對rHSA日益增長的需求至關重要。Recombinant Human ANGPTL7/CDT6 Protein,His-Avi TagHis-Avi Tag包含了特定肽段,分子量預測為50.20 kDa,但由于糖基化,其在Tris-Bis PAGE結果上遷移至55-60 kDa。
高保真Cas9變體在實際應用中的優勢主要體現在以下幾個方面:1.**降低脫靶效應**:高保真Cas9變體通過減少與非目標DNA序列的結合,從而降低了基因編輯過程中的脫靶風險。這對于減少基因編輯可能帶來的非預期效果至關重要。2.**提高特異性**:通過工程化改造,如SpCas9-HF1、eSpCas9和HypaCas9等變體,通過在DNA相互作用位點引入突變,減少了對目標DNA的非特異性識別和切割。3.**擴展PAM序列兼容性**:一些高保真Cas9變體,如xCas93.7,能夠識別多種PAM序列,從而擴展了可編輯基因組區域的范圍。4.**提高效果**:在臨床中,高保真Cas9變體可以減少由于脫靶效應引起的潛在風險,提高基因的安全性和有效性。然而,高保真Cas9變體也存在一些局限性:1.**編輯效率可能降低**:在提高特異性的同時,可能會有一定的編輯效率。一些高保真變體可能在保持特異性的同時,編輯效率有所下降。2.**結構和功能復雜性**:高保真Cas9變體的結構改造可能增加其結構和功能的復雜性,這可能對實際應用中的穩定性和可預測性帶來挑戰。3.**成本和可用性**:開發和生產高保真Cas9變體可能需要更多的研究和資源投入,這可能影響其在某些應用中的成本效益。
Benzonase核酸酶殘留檢測試劑盒的高重復性和準確性主要得益于以下幾個方面:1.**基于熒光探針的檢測方案**:該試劑盒使用熒光標記的DNA探針,當探針被Benzonase核酸酶切割時,會產生熒光信號,這種變化可以用來定量分析Benzonase的殘留量。此方法成功避免了ELISA檢測方法的一些限制,例如抗體的親和性能差異、非特異性反應以及蛋白濃度差異的問題。2.**高靈敏度**:試劑盒能夠檢測到低達約0.002U(約0.003ng)的Benzonase或BeyoZonase,樣品中的Benzonase濃度約為0.0002U/μl或0.3pg/μl,這為準確檢測提供了技術保障。3.**操作簡便快速**:檢測過程簡單,只需加入BenzDetectionSolution和待檢樣品,在定量PCR儀上15分鐘內即可完成檢測,減少了操作過程中可能出現的人為誤差。4.**標準曲線的建立**:試劑盒中提供了不同濃度的標準品,通過這些標準品可以建立標準曲線,從而準確計算出樣品中的Benzonase殘留量。5.**環境控制**:建議在超凈工作臺或生物安全柜等潔凈環境中進行檢測,以避免樣品受環境核酸酶的影響,保證檢測結果的準確性。蛋白在表達過程中形成包涵體,需要通過復性步驟恢復其活性。這通常涉及物質的存在下進行蛋白質的重折疊。
熒光探針法是一種利用熒光標記的分子(即熒光探針)來檢測和定量目標分子的方法。這種方法廣泛應用于生物化學、分子生物學和醫學診斷等領域。以下是熒光探針法的一些關鍵特點和工作原理:1.**熒光標記**:熒光探針是一類特殊的分子,它們含有可以發出熒光的化學基團(熒光團)。這些熒光團在受到特定波長的光激發時,會發出特定波長的光。2.**特異性結合**:熒光探針通常設計成能夠特異性地與目標分子結合,如DNA、RNA、蛋白質或其他小分子。這種結合通常是通過分子間的互補性,如氫鍵、疏水作用或離子鍵等實現的。3.**信號變化**:熒光探針在結合目標分子前后,其熒光特性(如熒光強度、波長、壽命等)會發生改變。這種變化可以是增強或減弱,取決于探針的設計和環境條件。4.**檢測原理**:-在**熒光共振能量轉移(FRET)**中,兩個不同的熒光團被設計成靠近,使得一個熒光團(供體)的能量可以非放射性地轉移到另一個熒光團(受體)。當供體和受體之間的距離改變(如由于目標分子的結合)時,FRET效率會改變,從而影響熒光信號。-在**熒光增強或減弱**中,探針的熒光特性直接受到其與目標分子結合的影響。例如,某些探針在結合DNA后,其熒光強度會增強。Pfu DNA Polymerase 具有較高的保真度,能夠在DNA合成過程中減少錯誤摻入的堿基,降低非目標突變的發生率。Abz-FR-K (Dnp)-P-OH
Taq DNA Polymerase 能夠在相對較高的溫度下保持穩定,其適催化溫度在75-80°C。Recombinant Mouse DDT Protein,His Tag
Benzonase核酸酶殘留檢測試劑盒通過以下方式實現高靈敏性:1.**熒光探針技術**:試劑盒采用熒光標記的DNA探針,這種探針在沒有Benzonase核酸酶的樣品中穩定存在且不產生熒光信號。當樣品中含有核酸酶殘留時,核酸酶會切割熒光標記的DNA探針,導致熒光信號的增強。這種變化可以用來定量分析Benzonase的殘留量,實現高靈敏度檢測。2.**熒光共振能量轉移(FRET)**:該技術利用了供體(Donor)和受體(Acceptor)熒光基團間的相互作用。在未切割狀態下,供體的熒光被受體淬滅,而一旦DNA探針被Benzonase切割,供體熒光基團與受體分離,熒光信號增強,從而實現高靈敏度的檢測。3.**優化的底物探針**:試劑盒中的Benzonase底物是一種合成的DNA寡核苷酸探針,其一端具有VIC熒光基團,另一端具有BHQ1淬滅基團。這種設計使得在底物被切割后,VIC熒光不再被BHQ1淬滅,從而可以非常靈敏地檢測到Benzonase核酸酶活性。4.**高靈敏度的檢測范圍**:試劑盒能夠檢測到低達約0.002U(約0.003ng)的Benzonase或BeyoZonase,樣品中的Benzonase濃度約為0.0002U/μl或0.3pg/μl,這遠低于常規同類產品的檢測限。Recombinant Mouse DDT Protein,His Tag
Probe qPCR Mix (2×, UDG Plus):高效防污染的探針法qPCR解決方案Probe qPCR Mix (2×, UDG Plus) 是一種為探針法實時熒光定量PCR(qPCR)設計的即用型預混液,結合了熱啟動Taq DNA聚合酶、優化的反應緩沖液、dUTP和UDG酶,能夠有效防止PCR產物污染,提高檢測的特異性和準確性。產品特點高特異性和靈敏度:采用抗體修飾的熱啟動Taq DNA聚合酶,結合優化的反應緩沖液,有效減少非特異性擴增,提高檢測靈敏度。防污染設計:預混液中包含UDG酶和dUTP,可在反應前降解含尿嘧啶的PCR產物,防止氣溶膠污染。多重檢測能力:支持多重qPCR反...