PNGaseF(肽-N-糖苷酶F,Peptide-N-glycosidaseF),也稱為N-糖酰胺酶F,是一種用于糖蛋白研究的酶,它可以從糖蛋白的N-連接糖鏈上去除糖基。以下是PNGaseF的一些關鍵特性和應用:1.**作用機制**:PNGaseF能夠特異性地切割位于天冬酰胺殘基上的N-連接糖鏈,釋放出未被糖基化的多肽部分和糖鏈。2.**應用領域**:PNGaseF在糖生物學和蛋白質組學研究中非常重要,用于分析糖蛋白的糖基化模式和結構。3.**酶的來源**:PNGaseF開始是從大腸桿菌(Escherichiacoli)中分離出來的,現在也可以通過重組DNA技術在其他宿主細胞中表達。4.**酶的純度和活性**:商業化的PNGaseF通常具有高純度和高比活性,確保了在實驗中的高效性和可重復性。5.**使用條件**:PNGaseF在溫和的條件下工作,通常在pH7.5至9.0之間,溫度在37°C左右。6.**穩定性**:PNGaseF在儲存時通常需要冷凍保存,以保持其活性。在適當的條件下,該酶可以保持穩定和活躍。7.**樣品準備**:在使用PNGaseF之前,糖蛋白樣品需要適當準備,可能包括純化和緩沖液交換,以確保反應條件的一致性。Pfu DNA Polymerase 具有較高的保真度,能夠在DNA合成過程中減少錯誤摻入的堿基,降低非目標突變的發生率。Recombinant Mouse DSG-2/Desmoglein-2 Protein,His Tag
IdeSProtease是一種免疫球蛋白G(IgG)特異性降解酶,它能夠在IgG的鉸鏈區下方的一個特定位點進行切割,產生F(ab')2和Fc片段。這種酶是通過大腸桿菌(E.coli)表達系統重組表達生產的,并且經過分子改造,使其具有更高的酶活和更廣的底物特異性。在生產過程中,確保IdeSProtease符合GMP(良好生產規范)標準,需要進行以下步驟:1.**分子改造**:通過分子生物學技術對IdeS進行改造,增強其穩定性和比活性。2.**大腸桿菌表達系統**:利用大腸桿菌表達系統進行IdeS的重組表達,確保無動物源性成分,減少病毒污染風險。3.**純化**:通過高度純化過程,確保IdeS的純度達到≥95%。4.**酶活定義**:1個酶活力單位定義為在37°C條件下,30分鐘內酶切1μg重組單克隆IgG所需的酶量。5.**質量控制**:每批產品都經過嚴格的質量控制,以確保產品批間穩定性和高穩定性。6.**儲存條件**:采用適當的儲存條件,如-30℃至-10℃凍存,確保產品在有效期內保持活性和穩定性。7.**微生物學安全性檢測**:進行無菌檢測、體內有毒物質的檢測、抗生物質殘留檢測、宿主細胞蛋白殘留檢測和病毒安全性檢測,確保產品符合微生物學安全性要求。
酵母重組表達的PNGaseF(N-糖苷酶F)是一種用于蛋白質去糖基化實驗的酰胺水解酶,具有以下特點以確保實驗中的活性和穩定性:1.**高效性**:具有高比活性,例如750000U/mL,這有助于快速高效地進行去糖基化反應。2.**穩定性**:在含有50%甘油的儲存緩沖液中,比較好的活性和穩定性可維持長達24個月。3.**使用條件**:可以在原生或變性條件下使用,對于變性條件下的去糖基化,建議添加NP-40以解除SDS的抑制作用。4.**儲存條件**:建議在-15~-25℃保存,有效期1年。5.**酶活定義**:1個酶活力單位指在10μL的反應體系中,37℃條件下1小時從10μg變性RNaseB中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量。6.**操作簡便**:提供了使用說明,包括變性和非變性條件下的蛋白質去糖基化步驟。7.**His標簽**:產品帶有His標簽,便于在實驗中進行純化和檢測。8.**純度**:純度達到95%以上,通過SDS-PAGE和完整ESI-MS進行確定。9.**快速反應**:有些產品如FastPNGaseF,可以在數分鐘內完成徹底且無偏好性地去糖基化。10.**注意事項**:產品供科研使用,操作時應穿戴適當的實驗室防護裝備。遵循這些指導原則和產品說明,可以確保PNGaseF在實驗中的活性和穩定性,從而獲得可靠的去糖基化結果。
11A型肺炎多糖鼠單抗是針對肺炎鏈球菌11A型多糖的單克隆抗體,具有以下特點:1.**特異性**:鼠單抗具有高度的特異性,能夠識別并結合到11A型肺炎鏈球菌的多糖抗原。2.**制備方法**:通過將肺炎多糖與乙肝表面蛋白的偶聯物作為抗原免疫小鼠,然后從小鼠脾細胞與骨髓瘤細胞融合,篩選出能夠表達特異性抗體的雜交瘤細胞株。3.**應用**:11A型肺炎多糖鼠單抗可用于定量檢測33F型肺炎多糖或乙肝表面蛋白,其制備的腹水型單抗對不同批次的樣本回收率為95%~105%。4.**疫苗開發**:在肺炎鏈球菌疫苗的研發中,多糖蛋白結合疫苗是當前的趨勢,通過將多糖與蛋白偶聯,可以提供更高效價的抗體水平和免疫記憶。5.**免疫反應**:11A型肺炎多糖鼠單抗能夠誘導小鼠產生針對肺炎多糖的血清抗體,這有助于研究肺炎鏈球菌的免疫機制。6.**疾病預防**:肺炎鏈球菌是引起肺炎、腦膜炎和敗血癥等嚴重疾病的主要病原體,11A型肺炎多糖鼠單抗的研究有助于開發更有效的疫苗,預防相關疾病。7.**研究進展**:已有研究報道了使用半合成寡糖結合疫苗候選物,能夠激發對肺炎鏈球菌3型的保護性免疫反應。
使用PreScissionProtease進行蛋白質切割后,可以采用以下方法來提高產品的純度:1.**親和層析**:利用GST標簽或His標簽等進行一步或多步親和層析,以高純度分離目的蛋白。2.**離子交換層析**:根據蛋白質的電荷特性,使用陽離子或陰離子交換層析進一步純化蛋白質。3.**凝膠滲透層析**:通過分子大小的排阻,去除分子量較大或較小的雜質。4.**反向層析**:使用反相高效液相色譜(HPLC)技術,根據蛋白質與固定相的疏水相互作用進行分離。5.**超濾/透析**:使用超濾膜或透析袋去除低分子量的雜質,如鹽分、緩沖液成分或小分子蛋白質。6.**二次親和層析**:在初次親和層析后,可以進行二次親和層析以進一步提高純度。7.**蛋白質純化柱**:使用商業化的蛋白質純化柱,如GST-Sepharose或Ni-NTA柱,進行快速純化。8.**等電聚焦電泳**:通過等電聚焦電泳(IEF)分離具有不同等電點的蛋白質。9.**SDS-PAGE**:使用SDS-PAGE凝膠電泳分析蛋白質的純度,并可通過凝膠切片回收相對純凈的蛋白質條帶。10.**質譜分析**:利用質譜技術鑒定蛋白質的確切質量和序列來確保蛋白質的純度和正確性。牛痘DNA拓撲異構酶I是一種來源于牛痘病毒的酶,有多種作用于DNA分子的能力。Recombinant Human Siglec-4a/MAG Protein,hFc Tag
將含有重組質粒的表達載體轉化到宿主細胞中,通常是大腸桿菌或其他合適的細胞系。Recombinant Mouse DSG-2/Desmoglein-2 Protein,His Tag
PNGaseF,Recombinant,ExpressedinYeast(酵母重組表達N-糖苷酶F)的高效性體現在以下幾個方面:1.**高比活性**:該酶具有高比活性,例如可達到750,000U/mL,這意味著單位體積的酶可以進行更多的反應循環,從而提高去糖基化的效率。2.**快速反應**:與傳統PNGaseF相比,某些優化版本的PNGaseF,如FastPNGaseF,能在更短的時間內完成去糖基化,要10分鐘。3.**徹底去糖基化**:該酶能迅速且無偏好性地去除幾乎所有N-連接的寡糖,包括高甘露糖型、雜合型和復雜型糖鏈,確保了去糖基化的徹底性。4.**直接分析**:去糖基化后的產物可以直接用于下游的色譜或質譜分析,無需額外的純化步驟,從而節省時間并提高分析的效率。5.**適用性**:適用于多種糖蛋白的去糖基化,包括抗體、免疫球蛋白、融合蛋白以及其他糖蛋白,增加了該酶的實用性。6.**優化的反應條件**:可以在變性或非變性條件下使用,增加了實驗設計的靈活性,并允許在不同條件下優化去糖基化效率。7.**簡化的實驗流程**:由于酶的高效性,實驗流程得以簡化,減少了反應體積和酶的使用量,同時保持了反應的靈敏度和重復性。
One Step RT-qPCR Probe Kit:高效、特異的RNA定量檢測解決方案One Step RT-qPCR Probe Kit 是一種為探針法實時熒光定量PCR(qPCR)設計的一步法試劑盒,適用于以RNA為模板的定量檢測。該試劑盒將逆轉錄(RT)和qPCR反應集成在同一反應管中,操作簡便,能夠有效防止污染,提高檢測效率。產品特點高靈敏度與特異性:采用高質量的逆轉錄酶和熱啟動Taq DNA聚合酶,結合優化的反應緩沖體系,能夠實現高靈敏度和高特異性的檢測。防污染設計:部分試劑盒引入了dUTP/UNG防污染系統,有效防止PCR產物污染,避免假陽性結果。操作簡便:RT和qPCR反應在同...