PreScissionProtease(PSP)是一種在蛋白質(zhì)純化和分析中使用的酶,具有以下特點:1.**特異性識別**:PSP能在低溫(4°C)下特異性識別八肽序列Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln-Gly-Pro或五肽序列Leu-Phe-Gln-Gly-Pro,并在Gln和Gly之間進行酶切。2.**應(yīng)用**:PSP常用于去除融合蛋白中的GlutathioneS-transferase(GST)、His等標簽,有助于純化目的蛋白。3.**純度高**:PSP的純度達到95%以上,確保了實驗的準確性和重復性。4.**穩(wěn)定性好**:PSP在含有50%甘油的儲存緩沖液中,-80℃長期儲存,有效期2年;小量分裝-20℃保存,有效期6個月。5.**酶活定義**:在5℃條件下反應(yīng)16小時,能夠切割100μg的GST標簽蛋白達90%以上所需的酶量定義為一個活性單位。6.**兼容性強**:PSP的酶切體系中可以兼容1%TritonX-100、Tween-20或NP-40,10mMEDTA和500mMNaCl。7.**注意事項**:某些化合物如100mMZnCl2、4mMAEBSF和100μMChymostatin會抑制PSP的酶活性50%以上。8.**優(yōu)化酶切效率**:建議進行預(yù)實驗摸索實驗濃度,實際操作中,建議酶用量1:25-1:100U/μg融合蛋白。將含有重組質(zhì)粒的表達載體轉(zhuǎn)化到宿主細胞中,通常是大腸桿菌或其他合適的細胞系。Recombinant Human KIR3DL3 Protein,His-Avi Tag
重組人血清白蛋白(rHSA)是通過植物表達系統(tǒng)生產(chǎn)的細胞培養(yǎng)級產(chǎn)品,在科研領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。以下是rHSA在科研中的一些主要應(yīng)用:1.**細胞培養(yǎng)**:rHSA是細胞培養(yǎng)中的重要成分,它可以作為血清替代品,促進細胞生長和維持細胞培養(yǎng)環(huán)境的穩(wěn)定性。由于其無動物源成分,可以減少血清中可能存在的病毒污染風險,適用于需要高生物安全性的細胞培養(yǎng)研究。2.**藥物載體**:rHSA因其良好的生物相容性和藥物結(jié)合能力,被用作藥物載體,有助于提高藥物的穩(wěn)定性、延長藥物的半衰期,并可能改善藥物的靶向性。3.**疫苗保護劑**:在疫苗開發(fā)中,rHSA可以用作保護劑,有助于提高疫苗的穩(wěn)定性和有效性。4.**細胞凍存保護劑**:rHSA在細胞凍存過程中起到保護作用,有助于提高細胞復蘇后的存活率。5.**醫(yī)療器械包埋劑**:在醫(yī)療器械領(lǐng)域,rHSA可以作為包埋劑,用于藥物洗脫支架或其他植入式醫(yī)療設(shè)備。6.**生物制藥**:rHSA在生物制藥生產(chǎn)中作為穩(wěn)定劑和保護劑,有助于提高蛋白質(zhì)藥物的穩(wěn)定性和療效。7.**基因**:在基因領(lǐng)域,rHSA可能被用作基因載體,幫助基因傳遞至目標細胞。8.**化妝品添加劑**:在化妝品行業(yè),rHSA可能因其保濕和修復特性而被用作添加劑。XenopsinPhusion DNA Polymerase 應(yīng)在后面加入反應(yīng)體系中,以避免其3'-5'外切酶活性降解引物。
酵母重組表達的N-糖苷酶F(PNGaseF)在實際應(yīng)用中具有以下優(yōu)勢:1.**高比活性**:具有高達750,000U/mL的比活性,這表明該酶在催化反應(yīng)中具有很高的效率。2.**快速反應(yīng)**:新型的FastPNGaseF能在數(shù)分鐘內(nèi)完成徹底且無偏好性的去糖基化,縮短了實驗時間。3.適用性:PNGaseF可以用于天然或變性條件下的糖蛋白或糖多肽的去N-糖基化修飾。4.**無其他糖苷酶活性**:該酶專一性高,無其他糖苷酶活性,確保了實驗結(jié)果的準確性。5.**His標簽**:帶有His標簽,便于通過親和層析進行純化和檢測。6.**穩(wěn)定性和儲存條件**:在含有50%甘油的儲存緩沖液中,-15~-25℃保存,有效期長達1年。7.**簡化的實驗流程**:FastPNGaseF簡化了實驗流程,減少了實驗時間,同時保持了靈敏度和重復性。8.**兼容性好**:去糖基化后的產(chǎn)物可以直接用于下游的色譜或質(zhì)譜分析,無需額外的純化步驟。9.**無偏好性**:能夠迅速且無偏好性地去除所有的N-糖鏈,確保了獲得的糖鏈分布能夠表示抗體的正確組成。
酵母重組表達的N-糖苷酶F(PNGaseF)是一種酰胺水解酶,具有以下特點:1.**高效性**:PNGaseF是去除幾乎所有N-連接寡糖從糖蛋白中有效的酶法方法。它能夠在幾分鐘內(nèi)快速且無偏倚地釋放所有的N-糖鏈,適合后續(xù)的色譜或質(zhì)譜分析。2.**重組酶**:該酶是重組的酰胺酶,能夠從高甘露糖、雜合和復雜寡糖中切割內(nèi)GlcNAc和天冬氨酸殘基之間的連接。3.**純度**:純度達到95%以上,通過SDS-PAGE和完整ESI-MS進行確定。4.**儲存穩(wěn)定性**:在含有50%甘油的儲存緩沖液中,好的活性和穩(wěn)定性可維持長達24個月。5.**使用條件**:可以在原生或變性條件下使用,對于變性條件下的去糖基化,建議添加NP-40以解除SDS的抑制作用。6.**比活性**:具有高達100000U/mL的比活性。7.**His標簽**:產(chǎn)品帶有His標簽,常用于抗體及其相關(guān)蛋白的完全去糖基化。8.儲存條件:-25~-15℃保存,有效期1年。9.**無甘油版本**:還提供了無甘油版本的PNGaseF,這有助于在HPLC和質(zhì)譜分析中獲得結(jié)果。10.**酶活定義**:1個酶活力單位指在10μL的反應(yīng)體系中,37℃條件下1小時從10μg變性RNaseB中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量。這些特點使得酵母重組表達的PNGaseF成為研究和分析糖蛋白糖鏈結(jié)構(gòu)的重要工具。UBE2L3在調(diào)節(jié)NF-κB信號通路中的作用可能對免疫反應(yīng)和炎癥過程至關(guān)重要。
PreScissionProtease(PSP)是一種由人鼻病毒14型的3C蛋白酶(humanrhinovirus(HRV)type143Cprotease)和GST組成的融合蛋白。它具有以下特點:1.**特異性識別**:PreScissionProtease能在低溫下(4°C)特異識別短肽Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln-Gly-Pro,并在Gln和Gly氨基酸殘基之間進行酶切。2.**依賴結(jié)構(gòu)**:底物的識別和切割不僅依賴于融合蛋白的一級結(jié)構(gòu),還依賴于融合蛋白的二級和三級結(jié)構(gòu)。3.**分離GST標簽**:它可以特異性的將pGEX-6P系列等載體表達出的帶有酶底物識別多肽序列融合蛋白的GST標簽進行分離。4.**表達宿主**:本品由大腸桿菌中重組表達,并以無菌液體形式提供。5.**物理性質(zhì)**:分子量約為46kDa,物理外觀為無菌無色液體。6.**儲存緩沖液**:25mMTris-HCl(pH8.0),150mMNaCl,1mMEDTA,5mMDTT,50%(V/V)Glycerin。7.**酶切緩沖液**:10×酶切緩沖液為500mMTris-HCl(pH7.0),1.5MNaCl,10mMEDTA,10mMDTT。8.**純度**:經(jīng)SDS-PAGE及HPLC分析,純度大于95%。9.**酶活定義**:在5℃條件下反應(yīng)16小時,能夠切割10μg的GST標簽的融合蛋白達90%以上所需的酶量定義為一個活性單位。Multiplex Probe qPCR Mix 已預(yù)混了低濃度ROX參比染料,適用于需要低濃度ROX校正的熒光定量PCR儀 。Recombinant Human LY75/CD205 Protein,His Tag
在基因編輯中,Pfu DNA Polymerase可以用于精確地引入特定位點的突變,或在基因組中插入特定的DNA序列。Recombinant Human KIR3DL3 Protein,His-Avi Tag
通過EndoS糖苷內(nèi)切酶S進行糖蛋白的糖鏈結(jié)構(gòu)分析通常涉及以下步驟:1.**樣本準備**:首先,需要獲得糖蛋白的純化樣本,以確保分析的準確性。2.**酶的準備**:準備適量的EndoS糖苷內(nèi)切酶S,根據(jù)實驗需要選擇合適的濃度和緩沖體系。3.**酶切反應(yīng)**:-將糖蛋白樣本與EndoS酶混合,在適宜的條件下(如pH、溫度等)進行酶切反應(yīng)。-反應(yīng)時間根據(jù)EndoS的活性和所需的切割程度來確定。4.**終止反應(yīng)**:在達到預(yù)期的酶切時間后,通過加熱或添加適當?shù)木彌_液來終止酶切反應(yīng)。5.**分離純化**:-使用色譜技術(shù)(如凝膠滲透色譜、離子交換色譜等)將酶切后的糖蛋白和釋放的糖鏈分離。-純化過程可能需要多步色譜以確保糖鏈的純度。6.**糖鏈分析**:-對分離得到的糖鏈進行進一步的結(jié)構(gòu)分析,可能包括質(zhì)譜分析、核磁共振(NMR)波譜分析等。-可以使用高分辨率的質(zhì)譜技術(shù),如MALDI-TOF或ESI-MS,來確定糖鏈的精確質(zhì)量。7.**序列鑒定**:通過與已知糖鏈數(shù)據(jù)庫比對,確定糖鏈的序列和結(jié)構(gòu)。8.**功能分析**:研究酶切后的糖蛋白和釋放的糖鏈對生物活性的影響,如結(jié)合特性、免疫原性等。9.**數(shù)據(jù)分析**:收集所有數(shù)據(jù)并進行綜合分析,以揭示糖鏈結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。
Probe qPCR Mix (2×, UDG Plus):高效防污染的探針法qPCR解決方案Probe qPCR Mix (2×, UDG Plus) 是一種為探針法實時熒光定量PCR(qPCR)設(shè)計的即用型預(yù)混液,結(jié)合了熱啟動Taq DNA聚合酶、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液、dUTP和UDG酶,能夠有效防止PCR產(chǎn)物污染,提高檢測的特異性和準確性。產(chǎn)品特點高特異性和靈敏度:采用抗體修飾的熱啟動Taq DNA聚合酶,結(jié)合優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液,有效減少非特異性擴增,提高檢測靈敏度。防污染設(shè)計:預(yù)混液中包含UDG酶和dUTP,可在反應(yīng)前降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止氣溶膠污染。多重檢測能力:支持多重qPCR反...