在分子生物學研究中,PCR技術是基因擴增的重要工具,而Pfu Master Mix (2×) (Without Dye) 則是實現(xiàn)高保真擴增的理想選擇。這種預混液結合了Pfu DNA聚合酶的高保真特性和優(yōu)化的反應體系,為科研人員提供了一個效率、便捷且可靠的實驗平臺。Pfu Master Mix (2×) (Without Dye) 是一種即用型的2倍濃度預混液,含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應緩沖液以及必要的輔助成分。Pfu DNA聚合酶以其保真性而聞名,其3'-5'外切酶活性能夠在DNA合成過程中糾正錯誤摻入的堿基,從而提高擴增產(chǎn)物的準確性。與Taq DNA聚合酶相比,Pfu酶的錯誤率更低,使其成為需要精確擴增的實驗(如基因克隆、突變分析和測序準備)的優(yōu)先工具。此外,Pfu Master Mix (2×) (Without Dye) 的無染料配方為實驗提供了更大的靈活性。實驗人員可以根據(jù)具體需求選擇后續(xù)的檢測方法,例如凝膠電泳分析、平末端克隆或測序,而無需擔心染料對結果的干擾。這種無染料設計特別適合需要進一步處理的PCR產(chǎn)物,例如用于構建重組質粒或進行下游功能分析。Pfu Master Mix (2×) (Without Dye) 的2倍濃度設計進一步簡化了實驗操作。實驗人員只需加入模板DNA和引物,即可直接進行反應,減少了手動配制反應體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差。使用體外轉錄技術合成gRNA,確保gRNA的質量和純度,這對后續(xù)實驗的成功至關重要 。Recombinant Human CLEC4M/CD299 Protein,His-Flag Tag
在分子生物學研究中,RNA的完整性分析是評估RNA質量和功能的重要環(huán)節(jié)。10×RNALoadingBuffer作為一種高效、便捷的上樣緩沖液,在RNA電泳實驗中發(fā)揮著不可或缺的作用。本文將詳細介紹10×RNALoadingBuffer的產(chǎn)品特點和性能。一、產(chǎn)品特點高濃度設計10×RNALoadingBuffer是一種10倍濃縮的上樣緩沖液,使用時需稀釋至1×。這種高濃度設計減少了試劑的使用量,同時保證了樣品在電泳過程中的穩(wěn)定性和均勻性。示蹤染料的雙重指示該緩沖液含有溴酚藍(BromophenolBlue)和二甲苯青(XyleneCyanolFF)兩種示蹤染料。溴酚藍在1.2%甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳中與約500個堿基的RNA遷移速率相當,而二甲苯青則與約5000個堿基的RNA遷移速率相當。這種雙重示蹤設計能夠直觀地反映電泳的進程,幫助實驗人員準確判斷RNA的遷移情況。無RNase污染RNA分子對RNase極為敏感,因此在RNA實驗中,避免RNase污染是關鍵。10×RNALoadingBuffer經(jīng)過嚴格的質量控制,確保無RNase雜質污染,從而保證RNA樣品的完整性。適用性該緩沖液適用于多種類型的RNA樣品,包括總RNA、小RNA以及特定RNA的片段的電泳分析。它不僅可用于甲醛變性的瓊脂糖凝膠電泳,也適用于非變性電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳。Recombinant Mouse NKG2D/CD314 Protein,His Tag該聚合酶還被應用于病原體基因組的擴增測序,以及修復受損DNA模板中的尿嘧啶,從而提高擴增產(chǎn)物的特異性。
dNTP/dUTPMixture(2.5mMeach/5mM):助力分子生物學實驗的高效防污染解決方案在分子生物學實驗中,PCR技術是基因擴增和檢測的工具之一。然而,PCR產(chǎn)物的殘留污染可能導致假陽性結果,嚴重影響實驗的準確性和可靠性。dNTP/dUTPMixture(2.5mMeach/5mM)作為一種高效的防污染試劑,通過與尿嘧啶DNA糖苷酶(UDG)聯(lián)合使用,能夠有效解決這一問題。產(chǎn)品特點高純度與穩(wěn)定性dNTP/dUTPMixture(2.5mMeach/5mM)采用高純度的dATP、dCTP、dGTP和dUTP,純度≥99%,確保實驗的準確性和重復性。該產(chǎn)品在-20℃下可穩(wěn)定保存24個月,使用時需避免反復凍融。防污染機制該產(chǎn)品通過在PCR反應中用dUTP替代dTTP,使擴增產(chǎn)物中摻入dU堿基。隨后,UDG酶能夠特異性地降解含有dU的DNA產(chǎn)物,從而有效去除殘留的PCR產(chǎn)物污染。這種防污染系統(tǒng)特別適用于高通量PCR實驗和需要嚴格控制假陽性的應用場景。兼容性與適用性dNTP/dUTPMixture適用于多種DNA聚合酶,如Taq酶和BstDNA聚合酶等,可用于PCR、real-timePCR、RT-PCR、引物延伸反應以及cDNA合成等多種分子生物學實驗。然而,需要注意的是,某些具有校正活性的酶可能不適用于該混合物,具體需參考酶的產(chǎn)品說明書。
10 mg/mL EB(溴化乙錠)溶液:凝膠電泳中的經(jīng)典染料溴化乙錠(Ethidium Bromide,簡稱EB)是一種廣泛應用于分子生物學實驗中的熒光染料,尤其在DNA和RNA凝膠電泳中用于染色和可視化DNA或RNA條帶。10 mg/mL的EB溶液是實驗室中常用的高濃度儲備液,能夠方便地稀釋至工作濃度,用于各種電泳實驗。產(chǎn)品特點高靈敏度:EB能夠特異性地嵌入DNA雙鏈的堿基對之間,在紫外光下發(fā)出強烈的熒光,使得DNA條帶在凝膠中清晰可見。適用范圍廣:適用于瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠電泳,可檢測DNA片段、質粒、基因組DNA以及RNA。即用型設計:10 mg/mL的EB溶液為高濃度儲備液,可根據(jù)實驗需求稀釋至工作濃度(通常為0.5-1 μg/mL),使用方便。穩(wěn)定性高:常溫保存,穩(wěn)定性好,無需特殊處理。應用場景DNA凝膠電泳:用于檢測PCR產(chǎn)物、質粒DNA、限制性酶切片段等。RNA凝膠電泳:用于分析RN片段大小、完整性以及降解情況。核酸染色:在Southern blot、Northern blot等實驗中,用于核酸的預染或后染。10 mg/mL的EB溶液是分子生物學實驗中不可或缺的工具,廣用于DNA和RNA的凝膠染色。其高靈敏度和穩(wěn)定性使其成為實驗室中的經(jīng)典染料。其優(yōu)化的緩沖體系和擴增因子使其在長片段擴增中表現(xiàn)出色,即使對于高GC含量或復雜結構的模板,也能實現(xiàn)。
One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus):高效、防污染的RNA定量檢測解決方案One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus) 是一種為探針法實時熒光定量PCR(qPCR)設計的一步法試劑盒,適用于以RNA為模板的高靈敏度定量檢測。該試劑盒將逆轉錄(RT)和qPCR反應集成在同一反應管中,簡化了實驗操作,降低了污染風險,同時引入了UDG防污染系統(tǒng),確保檢測的特異性和準確性。產(chǎn)品特點高效逆轉錄與擴增:采用耐熱逆轉錄酶和熱啟動Taq DNA聚合酶,能夠在寬廣的定量范圍內(nèi)提供穩(wěn)定的擴增性能。防污染設計:含有dUTP和UDG酶,可在反應前降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,有效防止氣溶膠污染。操作簡便:逆轉錄和qPCR反應在同一管中完成,無需額外開蓋或移液,減少了操作步驟和污染風險。多重檢測能力:支持多重qPCR反應,可在同一反應中同時檢測多個目標基因。高靈敏度:檢測靈敏度可達極低的RNA模板量(<5拷貝/反應),適用于微量RNA的檢測。應用場景病毒檢測:適用于RNA病毒(如病毒、流感病毒等)的快速定量檢測。基因表達分析:用于定量檢測特定基因的表達水平,尤其適合低豐度基因。高通量樣本分析:適合多樣本的單基因檢測,能夠明顯提高檢測效率。來源于 Thermococcus kodakaraensis,具有高熱穩(wěn)定性和校正能力,適用于長片段PCR和熱啟動PCR。Rabies Virus Glycoprotein
對于20 kb以上的長片段擴增,建議適當延長退火/延伸時間,并根據(jù)需要調整Mg2?和dNTP濃度。Recombinant Human CLEC4M/CD299 Protein,His-Flag Tag
5× RNA Loading Buffer:RNA電泳中的關鍵試劑5× RNA Loading Buffer 是一種為RNA凝膠電泳設計的即用型試劑,廣泛應用于RN片段的分離和分析。它通過添加特定的染料和高密度成分(如甘油或蔗糖),使RNA樣品在電泳過程中更容易沉降并被觀察,是RNA研究中不可或缺的工具。產(chǎn)品特點高密度與染料標記:5× RNA Loading Buffer 含有高濃度的甘油或蔗糖,能夠使RNA樣品在電泳時沉降于凝膠孔底部,避免漂浮。同時,其中的染料(如溴酚藍或二甲苯藍)可以指示RNA遷移的位置,便于實時觀察電泳進程。即用型設計:無需額外配制,直接與RNA樣品混合即可使用,簡化了實驗操作。兼容性強:適用于多種類型的RNA樣品,包括總RNA、mRNA、小RNA等,也兼容瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠電泳。穩(wěn)定保存:常溫保存,穩(wěn)定性高,無需特殊處理。應用場景RN片段分離:在瓊脂糖凝膠電泳中,用于分離和分析RN片段,如轉錄本大小分析、RNA降解產(chǎn)物檢測等。電泳指示:染料的遷移速率可以作為RN片段大小的參考,幫助判斷目標片段的位置。RNA回收:在RNA回收實驗中,幫助定位目標條帶,便于后續(xù)的切膠回收操作。Recombinant Human CLEC4M/CD299 Protein,His-Flag Tag
Pfu DNA聚合酶是一種從嗜熱古細菌 Pyrococcus furiosus 中提取的高保真DNA聚合酶,因其準確性和熱穩(wěn)定性而被廣應用于分子生物學研究。Pfu DNA聚合酶具有5'-3' DNA聚合酶活性和3'-5'外切酶活性,這種獨特的校正功能使其能夠在DNA合成過程中糾正錯誤摻入的堿基,從而提高擴增的保真性。與Taq DNA聚合酶相比,Pfu酶的錯誤率更低,其保真性是Taq酶的10倍以上。這種高保真性使其成為需要準確擴增的實驗(如基因克隆、突變研究和測序準備)的理想選擇。此外,Pfu DNA聚合酶具有出色的熱穩(wěn)定性,能夠在95°C的高溫下保持活性,適合PCR反應的高溫變性步驟。其擴增產(chǎn)...