抑肽酶（Aprotinin），一種絲氨酸蛋白酶抑制劑，廣泛應用于生物技術領域。本研究探討了利用大腸桿菌（E. coli）表達系統生產重組抑肽酶的方法，及其在科研和工業生產中的優勢。引言抑肽酶，又稱胰蛋白酶抑制劑，是一種小分子蛋白，能有效抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶等絲氨酸蛋白酶的活性。在生物制藥、細胞培養和分子生物學研究中，抑肽酶的使用對于防止非特異性蛋白水解至關重要。傳統的抑肽酶主要來源于動物，如牛肺，但存在外源病毒污染的風險。因此，利用大腸桿菌表達系統進行重組抑肽酶的生產，可以提供一種無動物源、高純度、質量穩定的替代品。材料與方法基因克隆與表達載體構建：人源Ⅲ型膠原蛋白基因被克隆并構建到適合大腸桿菌表達的質粒載體中。大腸桿菌表達菌株的構建：通過轉化，將構建好的質粒導入大腸桿菌宿主菌中，構建表達菌株。發酵培養：利用發酵罐進行大腸桿菌的擴大培養，以提升重組抑肽酶的產量。蛋白純化：通過多次柱純化獲得高純度的重組抑肽酶。N-糖苷酶 F (PNGase F)在酵母中重組表達，可以裂解由天冬酰胺連接的高甘露糖、雜合和復雜的寡糖糖蛋白。Recombinant Canine EGFProtein,His Tag

3C-like蛋白酶是中東呼吸綜合征冠狀病毒（MERS-CoV）等其它冠狀病毒的繁殖過程中極為重要的蛋白酶。它已成為人類在抗冠狀病毒領域中的研究熱點。本文基于計算生物學方法對與MERS-CoV同屬的蝙蝠冠狀病毒HKU4（HKU4-CoV）的43個肽類3C-like蛋白酶抑制劑分子，建立三維定量構效關系（3D-QSAR）模型。在基于配體疊合的基礎上，發現比較分子相似性指數分析法（CoMSIA）中的四個場組合（位阻場、靜電場、氫鍵供體場與氫鍵受體場）為比較好的模型（Q2=0.522，Rncv2=0.996，Rpre2=0.904；Q2：交叉驗證相關系數，Rncv2：非交叉驗證相關系數，Rpre2：驗證集分子的預測值相關系數），并借助該模型通過分子對接（docking）與分子動力學（MD）方法闡明了配受體結合作用。實驗結果表明：（1）基于比較好的CoMSIA模型基礎上的三維等勢圖形象地說明了分子基團的位阻作用、靜電作用、氫鍵供體與氫鍵受體作用對分子生物活性的影響；（2）分子對接研究結果顯示了疏水性以及結晶水、氨基酸His166和Glu169在配體和受體結合過程中產生重要作用；Recombinant Mouse MUC18/CD146 Protein,His Tag（FGF-21）是FGF基因家族的成員。 基于其結構，FGF-21與FGF-19和-23一起進一步分為FGF的亞家族。

CD19蛋白在B細胞和體液免疫反應中起著作用。成熟B細胞對抗原刺激、胚芽中心發育和抗體親和性成熟的反應能力是必需的。CD19已成為血液學和實體的有前途的靶點。產品性質同義詞CD19;B4;CVID3;Leu-12;MGC12802工會編號P15391來源生化重組人CD19蛋白表達于HK293細胞,標記于C-端。它含有金屬1-Lys291。分子量重組cd19由283個氨基酸組成,預測分子質量為31.6kda。純潔90%由社會發展秘書處----政策和兩性平等局確定。內用Lal法測定每一種蛋白質。公式化用0.22腔形過濾液對PBS進行凍干。凍干前添加5%-8%海藻糖、甘露醇和0.01%TWEen80作為保護劑。重建離心管打開前。建議將其重組為100克/毫升以上的濃度。在蒸餾水中溶解凍干蛋白。

N-糖苷酶F(PNGaseF)酶活定義（UnitDefinition）1個酶活力單位指在10μL的反應體系中，37℃條件下1小時從10μg變性RNaseB中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量。儲存條件-15~-25℃保存，有效期1年。使用說明變性條件下蛋白質去糖基化1）在水中加入1μLBuffer1和目標糖蛋白（1-20μg），至終體積10μL；2）100℃溫度下煮沸10min使其變性，冰上冷卻，離心10秒；3）加入2μL的Buffer2、2μL的10％NP-40、6μL去離子水，總反應體積20μL；4）加入0.2~0.5μL的PNGase，輕輕混勻。在37℃孵育1-3h。非變性條件下蛋白質去糖基化1）在水中加入2μL的Buffer2和目標糖蛋白（1-20μg）至體積為20μL。2）加入0.5~1μL的PNGaseF,輕輕混勻。3）37°C孵育4-24h。注意：在變性條件下大多數底物能夠更好的去糖基化，在非變性條件下可能需要增加PNGaseF的量和延長孵育時間。[Tyr1]-MIF-1配方：溶解于20 mM PBS, pH 7.4, 130 mM NaCl溶液中，并經0.22μm過濾后凍干而成。

CD40,alsoknownasTNFRSF5,isa45-50kDatypeItransmembraneglycoproteinmemberoftheTNFreceptorsuperfamily.MaturehumanCD40consistsofa173aminoacid(aa)extracellulardomain,atransmembranedomain,anda62aacytoplasmicdomain.CD40servesmultiplefunctionsinbothhematopoieticandepithelialcancersandisatargetfortumorimmunotherapy.DysregulationofCD40/CD40LigandexpressionandinteractionscontributestotheimmunedeficiencyassociatedwithHIVinfectionandAIDS.Itisalsoimplicatedinthepathologyofmultiplecardiovasculardiseasesincludingatherosclerosis,atherothrombosis,andrestenosis.產品性質別名CD40;CD40Lreceptor;TNFRSF5;CD40antigen;CD40molecule;CDw40;MGC9013;UniprotNo.P25942表達區間及表達系統RecombinantBiotinylatedHumanCD40/TNFRSF5ProteinisexpressedfromHEK293CellswithHistagandAvitagattheC-terminal.ItcontainsGlu21-Arg193.分子量Approximately22.1kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto35-40kDabasedonTris-BisPAGEresult.純度>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC.活性eotaxin-2還具有抑制髓樣細胞增殖的能力，髓樣細胞增殖是Eotaxin不共有的生物學功能。Recombinant Mouse CD5L Protein,His Tag

凝血酶是由大小分別為31 KD和6 KD的兩條肽鏈通過二硫鍵組成的一種絲氨酸蛋白水解酶。Recombinant Canine EGFProtein,His Tag

α-凝血酶（α-Thrombin）是一種高度特異性的絲氨酸蛋白酶，由凝血酶原（Prothrombin，II因子）經蛋白水解活化而來。它在凝血過程中起著非常重要的作用，不僅能夠促使纖維蛋白凝塊的產生，還負責提供反饋信號來尋找前輔因子：V因子和VIII因子。也可以用作血管收縮劑。在體內，活化的X因子（FactorXa）切割凝血酶原，釋放出活性肽并將凝血酶切割成具有催化活性的α-凝血酶。α-凝血酶由一條輕鏈（Achain）（Mw~6,000）和一條重鏈（Bchain）（Mw~31,000）通過二硫鍵連接而成。某些情況下，α-凝血酶會發生自溶生成β-凝血酶和γ-凝血酶。β-凝血酶由對α-凝血酶A鏈水解并切割含有B鏈糖基化位點的小片段（B1，B2）組合而成。除了用于凝血研究之外，α-凝血酶還常用來位點特異性切割融合蛋白。基因重組時將凝血酶識別位點插入在目的蛋白與利于后續純化和/或表達的多肽或者蛋白之間，通過凝血酶切割表達的重組子即可釋放目的蛋白。凝血酶本身可通過親和層析技術快速去除。本品是由勻質化的人凝血酶原經由Xa因子，Va因子和磷脂活化而得，經SDS-PAGE檢測確保凝血酶原的完全活化，并以NIH凝血酶的標準品為參考，提供的酶活力不少于3091NIHU/mg。Recombinant Canine EGFProtein,His Tag