抑肽酶(Aprotinin),一種絲氨酸蛋白酶抑制劑,廣泛應用于生物技術領域。本研究探討了利用大腸桿菌(E. coli)表達系統生產重組抑肽酶的方法,及其在科研和工業生產中的優勢。引言抑肽酶,又稱胰蛋白酶抑制劑,是一種小分子蛋白,能有效抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶等絲氨酸蛋白酶的活性。在生物制藥、細胞培養和分子生物學研究中,抑肽酶的使用對于防止非特異性蛋白水解至關重要。傳統的抑肽酶主要來源于動物,如牛肺,但存在外源病毒污染的風險。因此,利用大腸桿菌表達系統進行重組抑肽酶的生產,可以提供一種無動物源、高純度、質量穩定的替代品。材料與方法基因克隆與表達載體構建:人源Ⅲ型膠原蛋白基因被克隆并構建到適合大腸桿菌表達的質粒載體中。大腸桿菌表達菌株的構建:通過轉化,將構建好的質粒導入大腸桿菌宿主菌中,構建表達菌株。發酵培養:利用發酵罐進行大腸桿菌的擴大培養,以提升重組抑肽酶的產量。蛋白純化:通過多次柱純化獲得高純度的重組抑肽酶。跨膜蛋白的多功能性使它們成為理想的藥物作用靶點,例如四次跨膜蛋白CD20、Claudin18.2。Recombinant Human LILRB2/CD85d/ILT4(hFc Tag)
3C-like蛋白酶是中東呼吸綜合征冠狀病毒(MERS-CoV)等其它冠狀病毒的繁殖過程中極為重要的蛋白酶。它已成為人類在抗冠狀病毒領域中的研究熱點。本文基于計算生物學方法對與MERS-CoV同屬的蝙蝠冠狀病毒HKU4(HKU4-CoV)的43個肽類3C-like蛋白酶抑制劑分子,建立三維定量構效關系(3D-QSAR)模型。在基于配體疊合的基礎上,發現比較分子相似性指數分析法(CoMSIA)中的四個場組合(位阻場、靜電場、氫鍵供體場與氫鍵受體場)為比較好的模型(Q2=0.522,Rncv2=0.996,Rpre2=0.904;Q2:交叉驗證相關系數,Rncv2:非交叉驗證相關系數,Rpre2:驗證集分子的預測值相關系數),并借助該模型通過分子對接(docking)與分子動力學(MD)方法闡明了配受體結合作用。實驗結果表明:(1)基于比較好的CoMSIA模型基礎上的三維等勢圖形象地說明了分子基團的位阻作用、靜電作用、氫鍵供體與氫鍵受體作用對分子生物活性的影響;(2)分子對接研究結果顯示了疏水性以及結晶水、氨基酸His166和Glu169在配體和受體結合過程中產生重要作用;Recombinant Human S100A8 Protein,His Tag在某些疾病中,特定蛋白質的泛素化水平可能發生變化,因此,泛素化蛋白質可以作為疾病的生物標志物。
糖生物學中的應用糖基化分析Endo H常用于分析蛋白質的糖基化狀態。通過Endo H處理,可以將蛋白質上的高甘露糖型糖鏈去除,從而簡化糖鏈結構,便于進一步分析。蛋白質功能研究Endo H可用于研究糖基化對蛋白質功能的影響。通過比較Endo H處理前后蛋白質的生物學活性,可以揭示糖基化在蛋白質功能中的作用。藥物開發某些藥物的療效和藥代動力學特性受其糖基化狀態影響。Endo H可用于研究藥物分子的糖基化修飾,為藥物設計提供重要信息。疾病診斷異常的蛋白質糖基化與多種疾病相關。Endo H可用于檢測疾病相關蛋白質的糖基化改變,為疾病診斷提供新的思路。結論Endo H作為一種重要的工具酶,在糖生物學研究中發揮著關鍵作用。深入理解Endo H的結構與功能,將有助于揭示蛋白質糖基化在生命過程中的作用,為相關疾病的診斷提供新策略。
標題:牛凝血酶(Bovine Thrombin)的高比活應用及其在生物醫學研究中的重要性摘要牛凝血酶(Bovine Thrombin),一種高比活度的絲氨酸蛋白水解酶,具有>2000 IU/mg的特異性活性,廣泛應用于生物醫學研究和臨床,本文綜述了牛凝血酶的分子特性、在血液凝固中的作用機制以及其在科研和工業生產中的應用。引言牛凝血酶是從牛血漿中提取的酶,分子量為37KD,由兩條肽鏈(31KD和6KD)通過二硫鍵組成。作為凝血過程中的關鍵酶,牛凝血酶催化纖維蛋白原(fibrinogen)水解,形成纖維蛋白單體,進而促進血凝塊的形成。由于其高度的序列專一性和水解效率,牛凝血酶不僅在生理止血中發揮作用,也作為分子生物學研究中的工具酶。材料與方法產品性質分析:分析牛凝血酶的CAS號、分子量、比活度、外觀和純度等物理化學性質。運輸和保存方法:評估牛凝血酶的運輸條件和長期儲存穩定性。使用方法:探討牛凝血酶在不同實驗條件下的溶解、復溶和消化條件。全長膜蛋白由于其天然構象,是跨膜蛋白藥物開發中的好的抗原。在細胞中的表達水平通常較低。
Endo H糖苷內切酶H:結構、功能及其在糖生物學中的應用摘要Endo H糖苷內切酶H(Endo H)是一種專門切割N-連接糖鏈的內切酶,用于糖生物學和蛋白質工程領域。本文將探討Endo H的結構特性、催化機制、以及其在研究和臨床應用中的潛力。引言N-連接糖基化是一種在真核細胞中普遍存在的蛋白質修飾方式,涉及將糖鏈添加到蛋白質的天冬酰胺殘基上。Endo H作為一種內切酶,能夠特異性地識別并切割N-連接糖鏈中的β-N-乙酰葡糖胺苷鍵,從而在蛋白質工程和生物制藥中發揮重要作用。Endo H的結構特性Endo H通常來源于流感嗜血桿菌(Hemophilus influenzae),其分子質量約為50 kDa。該酶由兩個結構域組成:一個負責識別糖鏈的催化結構域和一個有助于酶穩定性的非催化結構域。催化機制Endo H的催化機制涉及對N-連接糖鏈的特異性識別和切割。酶的活性位點含有多個氨基酸殘基,這些殘基與糖鏈的特定結構相互作用,導致酶對底物的高特異性。Endo H催化的糖苷鍵斷裂是一水解反應,需要水分子的參與。酵母重組表達N-糖苷酶F(PNGase F)是一種通過酵母重組表達系統生產的酶。Recombinant Human PVRIG(mFc Tag)
透明質酸的衍生物可以作為基因傳遞的載體,或用于疫苗佐劑,增強反應。Recombinant Human LILRB2/CD85d/ILT4(hFc Tag)
透明質酸酶,英文名稱Hyaluronidase,一類能夠降低體內透明質酸活性的酶的總稱,結構上由4個相同亞基構成,每個亞基分子量接近14kDa,該酶是一種糖蛋白,包含5%的甘露糖和2.2%的葡萄糖胺。功能上該酶可隨機裂解透明質酸、軟骨素和硫酸軟骨素中的β-N-乙酰己糖胺-[1→4]糖苷鍵。常與膠原酶聯合使用于降解細胞外基質,從而從組織中分離活細胞。本品來源于牛睪丸,活力值為400–1,000units/mg,合適的pH值為4.5–6.0。產品性質中文別名(ChineseSynonym)玻璃糖醛酸酶;玻璃酸酶英文別名(EnglishSynonym)Hyaluronoglucosaminidase;Hyaluronate4-glycanohydrolaseCAS號(CASNO.)37326-33-3來源(Source)牛睪丸分子量(MolecularWeight)~55kDa類型(Type)I-S外觀(Appearance)淡黃色至米黃色至褐色粉末Recombinant Human LILRB2/CD85d/ILT4(hFc Tag)
Probe qPCR Mix (2×, UDG Plus):高效防污染的探針法qPCR解決方案Probe qPCR Mix (2×, UDG Plus) 是一種為探針法實時熒光定量PCR(qPCR)設計的即用型預混液,結合了熱啟動Taq DNA聚合酶、優化的反應緩沖液、dUTP和UDG酶,能夠有效防止PCR產物污染,提高檢測的特異性和準確性。產品特點高特異性和靈敏度:采用抗體修飾的熱啟動Taq DNA聚合酶,結合優化的反應緩沖液,有效減少非特異性擴增,提高檢測靈敏度。防污染設計:預混液中包含UDG酶和dUTP,可在反應前降解含尿嘧啶的PCR產物,防止氣溶膠污染。多重檢測能力:支持多重qPCR反...