重組酶是一類能夠促進DNA分子之間同源或非同源序列的重組的酶。它們在分子生物學、遺傳工程和細胞生物學中扮演著重要角色。重組酶的作用機制通常涉及識別特定的DNA序列,催化DNA鏈的斷裂和重新連接,從而實現遺傳物質的重組。重組酶的主要類型和功能包括:1.限制性內切酶**(RestrictionEnzymes):這些酶可以識別特定的DNA序列并在這些序列處切割DNA鏈。它們是基因工程中常用的工具,用于DNA片段的精確切割和克隆。2.連接酶(Ligases):連接酶可以將兩個DNA片段連接在一起,形成穩定的DNA分子。在DNA克隆和修復過程中,連接酶用于封閉切割位點產生的缺口。3.整合酶(Integrases):整合酶能夠將一段DNA序列插入到宿主基因組的特定位置。它們在基因和遺傳工程中具有應用。4.轉座酶(Transposase):轉座酶可以催化DNA片段從一個位置移動到另一個位置,這種機制在基因組中存在,并且在遺傳多樣性和進化中起著作用。5.**重組酶**(Recombinases):如RecA蛋白和Rad51蛋白,它們在同源重組中發揮作用,促進DNA雙鏈斷裂的修復和遺傳物質的重組。6.DNA聚合酶:這類酶在DNA復制和修復中添加新的核苷酸,以現有DNA鏈為模板合成新的DNA鏈。
Lambda核酸外切酶(LambdaExonuclease)高度特異性地作用于5'端磷酸化的雙鏈DNA主要通過以下幾個方面實現:1.**結構特異性識別**:Lambda核酸外切酶具有識別特定DNA結構的能力,特別是5'端磷酸化的雙鏈DNA。這種識別能力通常由酶的活性位點結構決定,能夠與5'-磷酸基團形成特定的相互作用。2.**酶活性位點**:酶的活性位點含有氨基酸殘基,這些殘基能夠與5'-磷酸基團形成氫鍵或其他非共價相互作用,從而穩定酶與DNA的結合。3.**切割機制**:Lambda核酸外切酶通過水解5'-磷酸二酯鍵來降解DNA鏈。它從5'端開始,逐個移除核苷酸,直到遇到非5'-磷酸化的末端或遇到結構上的障礙。4.**低活性對非特異性底物**:對于5'-羥基(OH)末端的DNA或單鏈DNA,Lambda核酸外切酶的活性降低,因為這些底物缺乏與酶活性位點結合所需的特異性相互作用。5.**酶動力學**:Lambda核酸外切酶對5'-磷酸化雙鏈DNA的酶動力學參數(如Km和Vmax)與對非特異性底物的參數有差異,這反映了其對特異性底物的高親和力和高催化效率。6.**過程性(Processivity)**:一旦Lambda核酸外切酶結合到特異性底物上,它可以連續移除多個核苷酸,而不需要頻繁地與底物解離和重新結合,這增加了酶的效率。Recombinant Human Siglec-15/CD33L3 Protein,His-Avi Tag全長跨膜蛋白CB1,即受體1(Cannabinoid Receptor 1),是一種G蛋白偶聯受體(GPCR)。
pA-Tn5轉座酶的產品組分通常包括以下幾個部分:1.**pA-Tn5轉座酶蛋白**:一種高活性的Tn5轉座酶突變體與ProteinA的融合蛋白,它是產品的主要組分,用于實現DNA片段化和接頭連接的功能。2.**儲存溶液**:碧云天的BeyoNGS?pA-Tn5轉座酶產品含有特定的儲存溶液,其組成為50mMHEPES(pH7.2),100mMNaCl,0.1mMEDTA,1mMDTT,0.1%TritonX-100,50%(v/v)Glycerol,這種溶液有助于保持酶的穩定性和活性。3.**測序接頭(Adapters)**:用于與pA-Tn5轉座酶組裝形成pA-Tn5轉座體(pA-Tn5Transposome),這是進行CUT&Tag實驗的必需組分。4.**反應緩沖液**:部分產品包含用于轉座酶反應的緩沖液,例如5×TagmentBuffer,這種緩沖液含有Mg2+,對轉座酶的活性至關重要。5.**附件**:某些產品可能還包括附件,如說明書,提供產品使用和保存的詳細信息。6.**其他組分**:根據產品的不同,可能還包括CouplingBuffer、AnnealingBuffer等其他輔助組分,這些組分有助于轉座酶與DNA的結合和反應的進行。7.**包裝規格**:pA-Tn5轉座酶的包裝規格可能有所不同,例如碧云天提供的BeyoNGS?pA-Tn5轉座酶有800pmol和4000pmol兩種包裝規格。
Lambda核酸外切酶的生產和應用涉及到多種生物技術和分子生物學技術,主要包括:1.**基因克?。℅eneCloning)**:首先將Lambda核酸外切酶的基因從噬菌體λ的基因組中克隆出來,并插入到質粒或其他載體中。2.**轉化(Transformation)**:將含有Lambda核酸外切酶基因的質粒轉化到宿主細胞,通常是大腸桿菌(E.coli),以便于在這些細胞中表達Lambda核酸外切酶。3.**表達系統(ExpressionSystems)**:利用原核或真核表達系統在宿主細胞中表達Lambda核酸外切酶的蛋白。4.**蛋白質純化(ProteinPurification)**:使用各種色譜技術,如親和層析、離子交換層析、凝膠過濾層析等,從宿主細胞的裂解物中分離和純化Lambda核酸外切酶。5.**PerfectProtein?技術平臺**:這是一種專有技術,用于生產高質量的重組蛋白,包括Lambda核酸外切酶。6.**熱失活(HeatInactivation)**:在某些應用中,可能需要通過熱處理來失活Lambda核酸外切酶,以終止其催化活性。7.**熒光共振能量轉移(FluorescenceResonanceEnergyTransfer,FRET)**:這是一種用于實時監測酶活性和動力學的技術,可用于研究Lambda核酸外切酶降解核酸的機制。
染料預混合的PCRMasterMix是一種特殊的PCR反應液,它在配方中已經預先加入了適合電泳分析的染料。這種設計使得PCR擴增后的產物可以直接用于凝膠電泳,無需額外添加上樣緩沖液,從而簡化了操作流程并減少了實驗時間。以下是一些關于染料預混合PCRMasterMix的特點:1.**方便性**:由于省去了擴增后添加上樣緩沖液的步驟,使得PCR到電泳的過渡更為簡便快捷。2.**一致性**:預混合的染料確保了每次PCR實驗中使用的染料濃度一致,有助于提高實驗結果的可重復性。3.**可視化**:一些染料預混合PCRMasterMix使用的染料在紫外光下具有明顯的熒光或顏色變化,有助于在電泳過程中實時監控DNA條帶的形成。4.**兼容性**:預混合的染料通常與各種類型的PCR儀器和電泳設備兼容。5.**穩定性**:預混合的染料在MasterMix中保持穩定,直到使用時才與DNA樣本接觸,減少了染料降解或失效的風險。6.**靈敏度**:某些染料具有較高的靈敏度,可以檢測到極少量的DNA,有助于提高PCR檢測的靈敏度。7.**安全性**:預混合的染料減少了操作過程中的接觸次數,降低了樣品交叉污染的風險。
跨膜蛋白的表達與制備需要采用合適的表達載體、宿主細胞、培養條件和純化工藝等方法,優化表達和純化過程。Recombinant Human IL-7R alpha/CD127 Protein,hFc Tag
Benzonase核酸酶殘留檢測試劑盒的高重復性和準確性主要得益于以下幾個方面:1.**基于熒光探針的檢測方案**:該試劑盒使用熒光標記的DNA探針,當探針被Benzonase核酸酶切割時,會產生熒光信號,這種變化可以用來定量分析Benzonase的殘留量。此方法成功避免了ELISA檢測方法的一些限制,例如抗體的親和性能差異、非特異性反應以及蛋白濃度差異的問題。2.**高靈敏度**:試劑盒能夠檢測到低達約0.002U(約0.003ng)的Benzonase或BeyoZonase,樣品中的Benzonase濃度約為0.0002U/μl或0.3pg/μl,這為準確檢測提供了技術保障。3.**操作簡便快速**:檢測過程簡單,只需加入BenzDetectionSolution和待檢樣品,在定量PCR儀上15分鐘內即可完成檢測,減少了操作過程中可能出現的人為誤差。4.**標準曲線的建立**:試劑盒中提供了不同濃度的標準品,通過這些標準品可以建立標準曲線,從而準確計算出樣品中的Benzonase殘留量。5.**環境控制**:建議在超凈工作臺或生物安全柜等潔凈環境中進行檢測,以避免樣品受環境核酸酶的影響,保證檢測結果的準確性。Recombinant Human IL-7R alpha/CD127 Protein,hFc Tag
Probe qPCR Mix (2×):高效、特異的探針法qPCR解決方案Probe qPCR Mix (2×) 是一種為探針法實時熒光定量PCR(qPCR)設計的即用型預混液,廣應用于基因表達分析、病原體檢測、SNP分型和拷貝數變異分析等領域。該預混液基于TaqMan等探針技術,通過熒光信號的實時監測實現對目標DNA序列的高靈敏度定量分析。產品特點高特異性和靈敏度:采用熱啟動Taq DNA聚合酶和優化的反應緩沖體系,有效減少非特異性擴增,提高檢測靈敏度??焖俜磻褐С挚焖賟PCR程序,可在短時間內完成檢測,提高實驗效率。防污染系統:部分產品含有dUTP/UNG(尿嘧啶DNA糖基化酶),能夠有...