pA-Tn5轉座酶是通過將ProteinA與Tn5轉座酶進行融合來構建的。ProteinA是一種來源于金黃色葡萄球菌的蛋白質,它具有高親和力結合大多數哺乳動物IgG抗體的Fc片段的能力。Tn5轉座酶是一種能夠識別特定DNA序列并在基因組上進行“剪切-粘貼”或“復制-粘貼”的酶。融合ProteinA的目的是為了在實驗中實現對特定蛋白質的靶向。下面是pA-Tn5轉座酶融合的一般步驟:1.**基因克隆**:首先,將Tn5轉座酶的基因和ProteinA的基因克隆到一個表達載體中。這通常涉及到分子克隆技術,如PCR擴增、限制性內切酶消化和連接酶連接。2.**融合蛋白設計**:設計一個融合蛋白,其中ProteinA的基因序列和Tn5轉座酶的基因序列通過一個短的連接肽(LinkerPeptide)相連。這個連接肽通常包含幾個氨基酸殘基,以確保兩個蛋白部分在融合后仍能保持各自的構象和功能。3.**表達載體構建**:將融合基因插入到適合的表達載體中,這個載體應該包含適當的啟動子、標記基因(如抗性基因)和終止子,以確保融合蛋白在宿主細胞中得到高效表達。4.**宿主細胞表達**:將構建好的表達載體轉化到宿主細胞(如大腸桿菌)中,通過誘導表達融合蛋白。Cas9 NLS可用于體外實驗中篩選能夠高效引導Cas9蛋白進行DNA剪切的gRNA序列 。Recombinant Human PLA2G1B Protein,His Tag
Benzonase核酸酶殘留檢測試劑盒的應用確實非常廣,主要體現在以下幾個方面:1.**生物制藥**:在生物制藥行業中,確保產品中無核酸酶殘留是非常重要的,以避免潛在的免疫反應或影響藥物的穩定性和效果。2.**重組蛋白純化**:在蛋白質的純化過程中,去除樣品中的核酸酶殘留對于提高純度和防止后續反應的干擾至關重要。3.**疫苗生產**:疫苗制備過程中,去除DNA污染是滿足監管要求和保障疫苗安全性的關鍵步驟。4.**細胞培養**:在細胞培養過程中,去除培養基中的核酸酶殘留有助于防止細胞受到不必要的酶活性影響。5.**分子生物學研究**:在分子生物學實驗中,如PCR、克隆、基因表達分析等,去除樣品中的核酸酶殘留可以避免實驗結果的偏差。6.**食品工業**:在某些食品加工過程中,使用Benzonase核酸酶來降低粘度或去除DNA/RNA,以改善產品特性或滿足特定的質量標準。7.**環境監測**:在環境樣本中檢測核酸酶殘留,以評估環境污染程度或監測特定生物活動。8.**法醫學和醫學診斷**:在法醫學檢測或某些醫學診斷過程中,準確檢測核酸酶殘留對于案件調查或疾病診斷具有重要意義。Recombinant Human TNFSF12 Protein,hFc TagC5a通過與髓源性抑制細胞 (MDSCs) 膜上的受體C5aR1結合,招募MDSCs至炎癥局部,抑制CD8+ T細胞增殖與功能。
1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)中的逆轉錄酶(ReverseTranscriptase,RT)具有一個關鍵特性:它們通過特定的突變消除了RNaseH活性。RNaseH是一種通常與某些逆轉錄酶相關的酶活性,它能夠降解RNA。然而,在1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)中,逆轉錄酶被設計成不具有這種降解RNA的能力,從而在合成cDNA的鏈時保護RNA模板不被降解。以下是1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)中逆轉錄過程的一般步驟,以及如何避免RNA降解:1.**RNA模板準備**:首先確保RNA模板的純度和完整性,避免DNA污染。可以通過DNaseI處理去除RNA樣品中的DNA污染。2.**混合反應組分**:將RNA模板、dNTPs(去氧核苷酸三磷酸)、逆轉錄引物(如oligo(dT)或隨機引物)和緩沖液混合。3.**逆轉錄酶添加**:加入經過突變處理的逆轉錄酶,這種酶缺乏RNaseH活性,因此不會在合成過程中降解RNA。4.**逆轉錄反應**:在適宜的溫度下進行逆轉錄反應,逆轉錄酶根據RNA模板合成cDNA鏈。5.**終止反應**:通過加熱至一定溫度來終止逆轉錄反應。
脫氧腺苷三磷酸(Deoxyadenosinetriphosphate,dATP)是一種去氧核苷酸三磷酸,它是DNA合成和復制過程中必需的原料之一。dATP的結構與腺苷三磷酸(ATP)相似,但dATP的五碳糖2號碳上缺少一個-OH基,取而代之的是一個氫原子。dATP是四種dNTPs(脫氧核糖核苷酸三磷酸)之一,四種dNTPs包括dATP、dCTP、dGTP和dTTP,它們分別對應DNA中的腺嘌呤、胞嘧啶、鳥嘌呤和胸腺嘧啶。dATP的化學式為C10H16N5O12P3,分子量為491.182,CAS登錄號為1927-31-7。在實驗室中,dATP通常以100mM的濃度提供,用于各種分子生物學技術,如PCR、DNA測序和分子克隆技術。dATP溶液需要在低溫條件下保存,通常是-20℃,以保持其穩定性和活性。在DNA測序中,dATP與ddATP一起使用,ddATP是dATP的衍生物,它缺少3'-OH基團,用于Sanger測序中的鏈終止反應。在PCR中,dATP作為DNA聚合酶的底物,用于合成新的DNA鏈。dNTPs的濃度在PCR反應中非常重要,適當的濃度有助于減少錯配和提高擴增效率。通常,四種dNTPs以等濃度混合使用,以減少PCR過程中的錯配誤差。在某些情況下,根據目標序列的長度和組成,可能需要調整dNTPs的濃度,以優化PCR反應。酵母重組表達N-糖苷酶F(PNGase F)是一種通過酵母重組表達系統生產的酶。
dGTPSolution(脫氧鳥苷三磷酸溶液)在分子克隆中扮演著重要角色,主要應用包括但不限于以下幾個方面:1.**DNA合成**:dGTP作為DNA聚合酶的底物之一,在分子克隆中用于合成新的DNA鏈,特別是在PCR擴增和cDNA合成中。2.**PCR擴增**:在常規PCR和高保真PCR中,dGTP提供必要的核苷酸,以確保目標DNA片段的準確復制。3.**cDNA合成**:在從mRNA模板合成cDNA的過程中,dGTP是合成互補DNA鏈的關鍵成分。4.**DNA測序**:dGTP也用于Sanger測序等DNA測序技術中,幫助合成測序反應中的DNA鏈。5.**質粒構建**:在質粒或其他載體的構建過程中,dGTP可能用于填補缺口或連接DNA片段。6.**引物延伸**:在引物延伸反應中,dGTP用于延伸引物,以合成完整的DNA鏈。7.**DNA標記**:dGTP可以用于DNA片段的標記,便于后續的克隆和檢測。dGTPSolution通常以100mM的濃度提供,以便于在實驗中根據需要進行稀釋。在使用時,應確保產品具有高純度、無DNase和RNase污染,以保證實驗的準確性和重復性。此外,dGTPSolution應儲存在-20°C的條件下,避免反復凍融,以保持其穩定性。2aR蛋白在細胞內發揮著不同的作用,例如在信號傳遞、物質轉運和細胞通訊等方面。Recombinant Human FcRH6/FCRL6 Protein,His Tag
可以利用現有的計算工具,如CRISPR design tools,預測gRNA的活性和特異性,以輔助實驗設計 。Recombinant Human PLA2G1B Protein,His Tag
T4UvsX重組酶的保存和純化是實驗室工作流程中的重要環節,確保了酶的穩定性和活性。以下是根據搜索結果提供的信息:保存條件:-T4UvsX重組酶通常在-20°C的條件下保存,可以保持3年的有效期。-某些產品說明中提到,該制品不含甘油,可用于建立凍干體系,這可能對長期保存和運輸有額外的好處。-建議避免反復凍融,因為這可能會影響酶的活性。純化過程:-T4UvsX重組酶是由大腸桿菌表達和純化的。這意味著科學家首先將T4噬菌體的uvsX基因克隆到適合在大腸桿菌中表達的質粒載體中。-然后將這個質粒轉化到大腸桿菌宿主細胞中,使其表達T4UvsX蛋白。-接下來,通過一系列生化步驟從大腸桿菌細胞中提取和純化T4UvsX蛋白,這些步驟可能包括細胞裂解、離心、層析等技術。注意事項:-T4UvsX重組酶的保存液中甘油含量為20%,建議單獨分裝保存,以避免反復凍融。-該酶無核酸酶活性,這表明它在催化反應時不會切割DNA鏈,而是促進DNA鏈的重組。-本產品用于科研用途,不應用于臨床診斷。應用:-T4UvsX重組酶主要用于等溫擴增技術,如重組酶聚合酶擴增(RPA),這是一種快速、靈敏的核酸檢測技術。通過遵循這些保存和純化指南,研究人員可以確保T4UvsX重組酶在實驗中的有效性和可靠性。Recombinant Human PLA2G1B Protein,His Tag
Probe qPCR Mix (2×, UDG Plus):高效防污染的探針法qPCR解決方案Probe qPCR Mix (2×, UDG Plus) 是一種為探針法實時熒光定量PCR(qPCR)設計的即用型預混液,結合了熱啟動Taq DNA聚合酶、優化的反應緩沖液、dUTP和UDG酶,能夠有效防止PCR產物污染,提高檢測的特異性和準確性。產品特點高特異性和靈敏度:采用抗體修飾的熱啟動Taq DNA聚合酶,結合優化的反應緩沖液,有效減少非特異性擴增,提高檢測靈敏度。防污染設計:預混液中包含UDG酶和dUTP,可在反應前降解含尿嘧啶的PCR產物,防止氣溶膠污染。多重檢測能力:支持多重qPCR反...